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- W1006098082 abstract "第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNA1^Leu和tRNA2^Leu,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍。用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNA^Leu2种等受体的识别,证明了tRNA1^Leu和tRNA2^Leu接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键。第二部分:大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上。研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响。构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同作用,用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法。研究了它们在体内的重组和前体的加工。研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶。" @default.
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