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• W1486323310 abstract "La transgenesis mediada por espermatozoides (SMGT) es un metodo de produccion de animales transgenicos. Se basa en la capacidad que presentan los espermatozoides de unir ADN exogeno y transferir el transgenicos a los ovocitos. Por otro lado, la proteina recombinasa de origen bacteriano RecA protege las cadenas simples de ADN de la degradacion, al crear una capa protectora. Este hecho da lugar a una mayor produccion de embriones viables e integracion del transgen en animales producidos mediante microinyeccion pronuclear e ICSI. El objetivo de este estudio fue investigar la capacidad de transferencia de los complejos RecA:ssADN en espermatozoides de cerdo, asi como la viabilidad de los mismos mediante citometria de fl ujo. En primer lugar, se recolecto el semen y se centrifugo para eliminar el plasma seminal. Se utilizo el plasmido EGFP que fue incubado con los espermatozoides a 16o C (grupo control). Para el grupo RecA, en primer lugar se desnaturalizo el ADN (95oC, 5 min) y seguidamente, se incubo con la proteina RecA en hielo durante 1h, transcurrido este tiempo estos complejos (RecA:ssADN) formados se incubaron con los espermatozoides a 16oC. La incubacion en presencia de la recombinasa RecA supuso un aumento signifi cativo del porcentaje de celulas unidas al ADN con respecto a espermatozoides intactos incubados unicamente con el gen EGFP (Control: 19.68±0.73% vs. RecA: 24.69±0.70%; p<0.01). Los resultados mostraron que para ambos grupos la union se produce principalmente a celulas no viables (Control: 19.21±0.71% vs. RecA: 24.11±0.69%; p<0.01), y en una muy baja relacion a espermatozoides viables (Control: 0.47±0.09% vs. RecA: 0.58±0.09%; p=0.40). Con este estudio hemos demostrado que los complejos RecA:ssADN interaccionan con los espermatozoides porcinos en mayor proporcion que para el caso de los espermatozoides unicamente incubados con el transgen, y para ambos casos esta asociacion se produce principalmente a celulas no viables. Por lo tanto se podria utilizar la SMGT combinada con tecnicas de reproduccion asistida como la ICSI para la obtencion de embriones y lechones transgenicos." @default.
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• W1486323310 title "EVALUACIÓN DE LA RECOMBINASA RECA SOBRE LA UNIÓN ESPERMATOZOIDE-ADN EXÓGENO EN LA TRANSGÉNESIS MEDIADA POR ESPERMATOZOIDES EN LA ESPECIE PORCINA" @default.
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