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• W1520976905 abstract "Staphylococcus aureus is a major hospital and community pathogen having the aptitude to cause a wide variety of infections in men. The ability of microorganisms to produce biofilm facilitates them to withstand the host immune response and is recognized as one factor contributing to chronic or persistent infections. It was demonstrated that the ica-encoded genes lead to the biosynthesis of polysaccharide intercellular adhesion (PIA) molecules, and may be involved in the accumulation phase of biofilm formation. Different studies have shown the decisive role of the ica gene as virulence factors in staphylococcal infections. This study was carried out to demonstrate the relationship between ica gene and production of slime layer in S. aureus strains. Sixty S. aureus strains were isolated from patients. The isolates were identified morphologically and biochemically following standard laboratory methods. After identification, the staphylococcal isolates were maintained in trypticase soy broth (TSB), to which 15% glycerol was added, and stored at -20°C. Slime formation and biofilm assay was monitored. A PCR assay was developed to identify the presence of icaD (intercellular adhesion gene) gene in all isolates. Thirty-nine slime producing colonies with CRA plates (65%) formed black colors, the remaining 21 isolates were pink (35%). In the quantitative biofilm assay 35 (58%) produced biofilm while 25 (42%) isolates did not exhibit this property. All isolates were positive for detection of icaD gene by PCR method. The interaction of icaA and icaD in the investigated isolates may be important in slime layer formation and biofilm phenomena. We propose PCR detection of the ica gene locus as a rapid and effective method to be used for discrimination between potentially virulent and nonvirulent isolates, with implications for therapeutic and preventive measures pertainin to the management of colonized indwelling catheters. Staphylococcus aureus ist ein wichtiger nosokomialer und community-assoziierter Krankheitserreger, der verschiedene humane Infektionen verursachen kann. Durch die Fähigkeit von Mikroorganismen zur Biofilmbildung wird ihre Widerstandsfähigkeit gegenüber der Immunabwehr mit der Folge chronischer oder persistierender Infektionen erhöht. Es wurde nachgewiesen, dass durch ica-codierende Gene die Biosynthese des interzellulären Polysaccharid-Adhäsins exprimiert wird, das eine Hauptkomponente für die Akkumulation des Biofilms darstellt. In verschiedenen Studien wurde die kritische Rolle der ica-Gene als Virulenzfaktor für Staphylokokken-Infektionen nachgewiesen.Die vorliegende Untersuchung wurde durchgeführt, um den Zusammenhang zwischen dem ica- Gen und der Schleimbildung durch S. aureus zu analysieren. Hierzu wurden 60 S. aureus Patientenisolate identifiziert, morphologisch und biochemisch nach Standardmethoden charakterisiert und in Trypticase-Soja-Bouillon (TSB) mit Zusatz von 15% Glycerol bei –20°C aufbewahrt. Die Schleimbildung und Biofilmbildung wurde in einem speziellen Assay detektiert. Mittels eigens entwickelter PCR wurde alle Isolate auf das Vorkommen des icaD (intercellular adhesion gene) untersucht. Von den auf CRA-Platten Schleim produzierenden Kolonien waren 39 (65%) schwarz, die anderen 21 (35%) pinkfarben. Im quantitativen Biofilmassay bildeten 35 der Isolate (58%) einen Biofilm. Bei all diesen Isolaten wurde das icaD-Gen nachgewiesen. Des lässt den Schluss zu, dass der PCR-Nachweis des ica-Locus als rasche und effektive Methode zur Unterscheidung zwischen potentiell virulenten and avirulenten Isolaten herangezogen werden kann, um die Therapie und Prävention der Biofilmbildung auf Implantaten zu verbessern. Der Synergismus zwischen icaA und icaD in den untersuchten Isolaten scheint bedeutend für die Schleimbildung und Biofilmakkumulation sein." @default.
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