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• W1601278005 abstract "El genero Aeromonas esta constituido por bacilos Gram negativos y comprende patogenos de animales poiquilotermos y oportunistas en humanos. El lipopolisacarido (LPS) es un importante factor de virulencia de Aeromonas hydrophila, por lo que se planteo hallar los genes implicados en la biosintesis del nucleo del LPS de la cepa AH-3. Con este fin, se aislaron tres mutantes por insercion del transposon mini-Tn5::Km1 con un fenotipo alterado del nucleo, lo que permitio la caracterizacion de tres regiones wa genomicas distintas. La construccion de mutantes en los genes en los que fue posible y la elucidacion de la estructura quimica de su nucleo mediante ESI MS y el analisis de metilacion de los monosacaridos, permitio, junto con el analisis fenotipico del LPS mediante SDS-PAGE y los datos obtenidos a partir de su secuencia y de ensayos de complementacion, asignar funciones a cada uno de ellos. Las regiones 2 y 3 wa, constituidas por 4 y 2 genes, respectivamente, codifican las enzimas para la biosintesis del nucleo interno. La region 1 wa contiene 7 genes que codifican la epimerasa HldD, la ligasa del antigeno O WaaL y las transferasas para la biosintesis del nucleo externo y la incorporacion de la L,D-HepIV. Ademas, se estudio la distribucion de distintos genes del nucleo y se observo su elevada conservacion entre diferentes serotipos de Aeromonas mesofilas.Por otro lado, se realizo el analisis y la caracterizacion funcional de algunos de los genes de la agrupacion wb de la cepa AH-3 responsable de la biosintesis del antigeno O:34, obtenida en un estudio anterior. Consta de 17 genes entre los que se incluyen genes para la biosintesis de GDP-manosa y dTDP-6-desoxi-L talosa y para la transferencia de sus monosacaridos, para la modificacion del antigeno O con acetilaciones, para el inicio de la sintesis de las subunidades O (wecA), su transporte (wzx) y su polimerizacion (wzy), y para la determinacion de la longitud de la cadena (wzz). La region promotora del gen wzz, localizada en funcion de la determinacion de su inicio de transcripcion por 5'RACE, presentaba una regulacion por temperatura, de manera que el nivel de transcripcion/expresion del gen era menor a 37oC que a 20oC, segun los ensayos de RT-PCR semicuantitativa y de la actividad β-galactosidasa de la fusion transcripcional de la region promotora con el gen indicador lacZ.Este hecho ofrece una explicacion a la diferente produccion del LPS que presenta la cepa AH-3 a ambas temperaturas." @default.
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