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• W178490765 abstract "El proceso de reciclado de las vesiculas sinapticas es una caracteristica integral de la funcion presinaptica y determina su habilidad para mantener la liberacion del neurotransmisor durante una actividad repetitiva. En esta tesis, caracterizamos el reciclado de las vesiculas sinapticas en el terminal neuromuscular de raton y estudiamos su regulacion por los canales de calcio dependiente de voltaje (CCDV), especificamente el canal de calcio tipo L, y por el neuromodulador adenosina. Para desarrollar este trabajo, utilizamos indicadores fluorescentes tipo FM para marcar la membrana de las vesiculas sinapticas y tecnicas electrofisiologicas para cuantificar la liberacion de las vesiculas sinapticas. En el terminal neuromuscular de raton, determinamos que el reciclado vesicular es regulado por el nivel de actividad neuronal. La estimulacion a alta frecuencia produce la movilizacion de dos pooles funcionales de vesiculas sinapticas que difieren en su disponibilidad de liberacion. En base a esta caracteristica, definimos estos pooles como pooles vesiculares de liberacion rapida o lenta. Por otro lado, evidenciamos que la duracion de la estimulacion a alta frecuencia determina un reciclado vesicular selectivo y secuencial hacia estos pooles vesiculares funcionales. El influjo de calcio a traves de los CCDV tiene un papel clave en la senalizacion neuronal durante el proceso de la neurotransmision, coordinando el reciclado de las vesiculas sinapticas. En este trabajo presentamos evidencias directas que vinculan al CCDV tipo L con la regulacion del reciclado vesicular. Hemos confirmado la funcionalidad de CCDV tipo L durante estadios plasticos del terminal neuromuscular. Es decir, observamos la participacion de estos canales unicamente durante periodos de actividad neuronal sostenida e intensa. Se demostro que el influjo de calcio a traves del CCDV tipo L promueve la endocitosis y la recuperacion de las vesiculas sinapticas hacia el pool vesicular de liberacion rapida, regulando la eficiencia sinaptica durante la actividad neuronal intensa. La adenosina es un neuromodulador bien establecido en la union neuromuscular de raton. En ausencia del efecto de la adenosina endogena sobre los receptores A1, evidenciamos un incremento en la exocitosis vesicular y en el tamano del pool de reciclado vesicular, y un direccionamiento de reciclado vesicular hacia el pool de liberacion rapida. Debido a que la adenosina y el bloqueo del CCDV tipo L presentaron un efecto similar sobre el reciclado vesicular, una hipotesis plausible fue que la adenosina a traves de un efecto inhibitorio sobre el CCDV tipo L afectaria el reciclado vesicular. A traves de evidencias experimentales esta hipotesis fue rechazada. En base a las similitudes observadas en el reciclado vesicular, es factible suponer que tanto la adenosina como el bloqueante del CCDV tipo L inhiben un mecanismo comun." @default.
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