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• W17961552 abstract "Les cellules souches pluripotentes humaines (hPSC) sont des cellules capables a la fois d'autorenouvellement et de se differencier en tous les types cellulaires. Elles peuvent etre issues de l'embryon (pour cellules souches embryonnaires humaines, hESC) ou etre obtenues par reprogrammation d'une cellule differenciee (pour cellules souches pluripotentes induites humaines, hiPSC). Les hPSC sont au centre d'enjeux scientifiques, medicaux et economiques majeurs, en particulier dans le cadre des maladies genetiques et orphelines. En effet, elles ouvrent la porte a de nouvelles strategies de modelisation de maladies genetiques humaines in vitro et sont une source potentiellement illimitee de cellules pour une therapie cellulaire des maladies degeneratives. Cependant, la culture in vitro de hPSC est une etape essentielle avant toute application clinique ou recherche fondamentale. En effet, la culture cellulaire est necessaire pour l'amplification du nombre des cellules, et est necessaire pour toute etape de differenciation in vitro. Or c'est une etape delicate pour le succes des applications visees. Mon travail de doctorat s'est focalise sur deux aspects de la culture des hPSC. Dans un premier temps, j'ai modelise in vitro une voie de differenciation, le developpement trophoblastique humain, en modulant les parametres de la condition de culture, notamment en jouant sur la concentration du facteur de croissance BMP4. Ce travail m'a permis d'elucider la toute premiere bifurcation de differenciation cellulaire au cours du developpement embryonnaire humain precoce. Dans un second temps, mon travail s'est focalise sur le changement phenotypique et genomique des hPSC au cours de la culture in vitro. J'ai montre que l'utilisation de certains protocoles de passage cellulaire – en particulier le passage par dissociation cellulaire complete par utilisation de trypsine - se traduit par des acquisitions tres precoces d'anomalies genetiques chromosomiques et sub-chromosomiques, et que des anomalies sub-chromosomiques pouvaient preceder l'apparition d'anomalies chromosomiques. Les consequences de ces observations sont importante pour la recherche de la culture de hPSC : (1) il faut definitivement renoncer a l'utilisation des passages par dissociation cellulaire complete, y compris pour les methodes de culture en suspension, et (2) il faut, pour valider une technique de culture, completer systematiquement le caryotype par un examen d'analyse genetique avec une meilleure resolution." @default.
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