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- W2003304412 abstract "À l’heure actuelle, il n’existe aucun traitement pour le cancer du pancréas (CP). Nous avons démontré que le microARN oncogénique miR-21 est augmenté de façon significative dans les lésions précancéreuses ainsi que dans le CP. Cependant, l’intérêt du ciblage de miR-21 pour la thérapie par transfert de gène du CP reste à démontrer.Nous avons cloné des vecteurs lentiviraux ciblant miR-21 par interférence à ARN (LV a/miR-21). Comme témoin, nous avons produit un vecteur codant pour la GFP (LVGFP). Ces vecteurs sont produits en confinement P3 et certifiés dépourvus de particules recombinantes. L’efficacité de transduction est mesurée par FACS. L’expression de miR-21 est mesurée par qRTPCR. La prolifération cellulaire est mesurée par comptage et par test de viabilité. Le cycle cellulaire est analysé par incorporation d’iodure de propidium, et l’étude des voies apoptotiques par Western blot.Les vecteurs LV a/miR-21 transduisent les lignées cellulaires dérivées de cancer du pancréas humain, avec une grande efficacité en absence de sélection (99 % pour MOI = 5), et diminuent l’expression de miR-21 (de 65 %% à 95 %), en comparaison avec les lignées témoins transduites par LVGFP. Dans un modèle classique de culture cellulaire bidimensionnelle, l’invalidation de miR-21 s’accompagne d’un puissant effet inhibiteur sur la prolifération cellulaire, et provoque la mort cellulaire par apoptose. Dans un modèle orignal de cellules cancéreuses cultivées en 3D (sphéroïdes), l’invalidation de miR-21 provoque l’inhibition de la prolifération et du pouvoir invasif de ces cellules.L’invalidation par interférence à ARN de miR-21 par voie lentivirale inhibe la prolifération des cellules cancéreuses et entraine leur mort par apoptose. Ce travail est la première démonstration de l’efficacité du ciblage de microARNs oncogéniques pour la thérapie des cancers, notamment pancréatique." @default.
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