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- W2023773618 abstract "Objective: To determine the superoxide dismutase (SOD) activity from clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis and to study the seroreactivity of SOD from M. tuberculosis H37Rv. Design: Crude cell extracts of 16 strains of M. tuberculosis isolated from tuberculosis (TB) patients were assayed for SOD activity. SOD from H37Rv was partially purified and characterized, and the seroreactivity was studied by ELISA using sera from 36 active pulmonary TB and 31 leprosy patients. Results: SOD activity was detected in all the 16 strains of M. tuberculosis and also in the medium of logarithmic and stationary cultures of H37Rv. SOD activity from H37Rv extract was not affected by 1 mM KCN or by 5 mM H2O2 and was only 20% inhibited by 10 mM NaN3, suggesting that it is a Mn-containing enzyme. SOD was partially purified from H37Rv extract by gel filtration chromatography as a tetramer of molecular weight (MW) of 80 000 and a subunit MW of ~ 23 000. A delayed type hypersensitivity was elicited by SOD in guinea pigs sensitized with H37Rv or M. leprae sonicate. ELISA using SOD as antigen indicated 100% positivity with TB sera, while 84% positivity was observed with leprosy sera. Western blotting with pooled TB and leprosy sera indicated the presence of antibodies to the 23 kD SOD protein. Conclusion: Our data indicate that M. tuberculosis strains are rich in SOD, and the secretion of SOD may play a valuable role in the pathogenesis of M. tuberculosis. Objet: Déterminer l'activité de la superoxyde-dismutase (SOD) des isolats cliniques de Mycobacterium tuberculosis, et étudier la séroréactivité de la SOD de M. tuberculosis H37Rv. Schéma: Des extraits bruts de cellules provenant de 16 souches de M. tuberculosis isolées de malades atteints de tuberculose ont été analysés afin de déterminer l'activité de la SOD. SOD provenant de H37Rv a été en partie purifiée et caractérisée, et la séroréactivité a été étudiée par technique ELISA utilisant des sérums de 36 patients atteints de tuberculose pulmonaire active et de 31 patients atteints de lèpre. Résultats: L'activité de la SOD a été décelée dans la totalité des 16 souches de M. tuberculosis et également dans le milieu des cultures logarithmiques et stationnaires de H37Rv. L'activité de la SOD en provenance de l'extrait H37Rv n'a pas été affectée par 1 mM de KCN ni par 5 mM d'H2O2 et n'a été inhibée que de 20% par 10 mM de NaN3; ceci suggère que c'est une enzyme qui contient du manganèse (Mn). SOD a été purifiée partiellement à partir de l'extrait H37Rv par chromatographie de filtration sur gel comme un tétramère de poids moléculaire (PM) de 80 000 et une sous-unité de PM de 23 000. Une hypersensibilité de type retardé a été obtenue par SOD chez des cobayes sensibilisés par H37Rv ou par ultrason de M. leprae. La technique ELISA utilisant SOD comme antigène a montré une positivité de 100% avec des sérums tuberculeux tandis qu'une positivité de 84% a été observée avec les sérums lépreux. Un Western Blotting (immunotransfert) avec des sérums regroupés de la tuberculose et de la lèpre a indiqué la présence d'anticorps à la protéine de la SOD 23kD. Conclusions: Nos données indiquent que les souches de M. tuberculosis sont riches en SOD, et que la sécrétion de SOD pourrait jouer un rôle important dans l'effet pathogène de M. tuberculosis. Objetivo: Determinar la actividad de la superóxido-dismutasa (SOD) a partir de aislados clínicos de Mycobacterium tuberculosis y estudiar la sero-reactividad de SOD proveniente de M. tuberculosis H37Rv. Método: Se investigó la presencia de actividad SOD en extrados cructos de células de 16 cepas de M. tuberculosis aisladas a partir de pacientes con tuberculosis (TB). La SOD proveniente de H37Rv fue parcialmente purificada y caracterizada y se estudió la sero-reactividad por la prueba ELISA, utilizando suero proveniente de 36 pacientes con TB pulmonar activa y 31 pacientes con lepra. Resultados: La actividad SOD se detectó en la totalidad de las 16 cepas de M. tuberculosis y también en el medio de cultivos logarítmicos y estacionarios de H37Rv. La actividad SOD proveniente de extractos de H37Rv no se vio afectada por 1 mM de KCN ni por 5 mM de H2O2 y fue inhibida sólo en 20% por 10 mM de NaN3, lo que sugiere que se trata de una enzima que contiene Mn. La SOD fue purificada parcialmente, a partir de extractos de H37Rv por cromatografía de filtración en gel, como un tetrámero de peso molecular (PM) de 80 000 y una sub-unidad de PM 23 000. Se detectó una hipersensibilidad de tipo retardado por SOD en cobayos sensibilizados con sonicatos de H37Rv o de M. leprae. La prueba ELISA que utiliza SOD como antígeno dio un 100% de positividad con suero TB, mientras que con suero de lepra la positividad fue de 84%. El método de inmunotransferencia Western blotting con suero combinado TB y lepra mostró la presencia de anticuerpos a la proteína 23kD de SOD. Conclusión: Nuestros resultados indican que las cepas de M. tuberculosis son ricas en SOD y que la secreción de SOD puede desempeñar un papel importante en la patogenicidad de M. tuberculosis." @default.
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