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- W2024577073 abstract "Good evidence is provided that fMet-tRNA binding and aminoacid incorporation, when single-stranded DNA is used instead of mRNA in an E. coli cell-free system, are strictly dependent on the magnesium concentration. Ten sites homologous to the initiation sites of translation can be detected on denatured T5 stO DNA when using ribosomes and initiation factors from uninfected E. coli F. In S-30 extracts, at high magnesium concentrations and in the presence of neomycin, initiation of the translation of denatured T5 stO DNA begins anywhere on the molecule, and yet high molecular weight polypeptides are synthesized. The template potentiality of the denatured T5 stO DNA decreased when using ribosomes plus initiation factors and crude extracts from T5 stO-infected bacteria. By in vitro formation of initiation complexes sites analogous to initiation sites of translation were localized on T5 stO DNA molecules using single-straded fragments separated by sedimentation in alkaline sucrose gradient. Dans un système de synthèse protéique in vitro utilisant le DNA dénaturé de T5 stO comme messager, la fixation du fMet-tRNA sur les ribosomes et l'incorporation des acides aminés en produit TCA insoluble est strictement dépendante de la concentration en magnésium. Ainsi, 10 sites homologues de sites d'initiation de la traduction ont été mis en évidence sur le DNA dénaturé de T5 stO en utilisant des ribosomes et des facteurs d'initiation d'E. coli F non infectée. Quand on utilise un extrait brut (S-30) comme système in vitro, à haute concentration en magnésium et en présence de néomycine, l'initiation de la traduction commence n'importe où sur la molécule du DNA dénaturé de T5 stO et cependant des polypeptides de haut poids moléculaire sont synthétisés. D'autre part, l'utilisation de ribosomes et de facteurs d'initiation, et de S-30, issus de bactéries infectées par T5 stO, a permis d'observer une décroissance de l'activité matricielle du DNA dénaturé de T5 stO. Les sites homologues des sites d'initiation de la traduction ont été localisés sur les fragments de la molécule de DNA de T5 stO, séparés sur un gradient de saccharose alcalin." @default.
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