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• W2055894777 abstract "Ziele: Aminopeptidase N (CD13) gilt als endothelialer Marker für Neovaskularisation im Rahmen der Tumor-induzierten Angiogenese. Ziel dieser Arbeit war es, ein APN/CD13-zielgerichtetes Fluorochrom zu synthetisieren, um den Expressionsgrad von APN/CD13 in Tumor-Xenograftmodellen mittels planarer (FRI) und tomographischer optischer Bildgebung (FMT) in vivo darzustellen. Methode: Ein APN/CD13 affines cyclisiertes NGR-Peptid wurde mit dem Cyanin-Farbstoff Cy 5.5 markiert (NGR-Cy5.5). Die Bindungsaffinität des optischen Tracer-Moleküls wurde fluoreszenzmikroskopisch an HT-1080-Fibrosarkom- und MCF-7-Adenokarzinom-Zellen überprüft. Die Bindespezifität wurde durch die Zugabe von unmarkiertem NGR-Peptid vor Inkubation mit NGR-Cy5.5 bestimmt. Freies Cy 5.5 oder NGR-Cy5.5 wurde für in vivo-Studien HT-1080- sowie tragenden Nacktmäusen (nu/nu) i.v. injiziert (2 nmol). In Kompetitionsstudien wurde die Bindungsspezifität durch Vorspritzen von 200 nmol nicht-markiertem Peptid sichergestellt. Mittels 2D-Fluoreszenz-Reflektionsbildgebung (FRI) sowie 3D-Fluorezenztomographischer Verfahren (FMT) erfolgte der Nachweis der markierten Tracer über 24 Stunden nach Injektion. Ergebnis: In vitro zeigte das Peptid-Fluoreszenz-Konjugat NGR-Cy5.5 distinkte Bindungsaffinität zu APN-positiven HT-1080 Zellen, wohingegen bei APN-negativen MCF-7 Zellen keine Fluoreszenz nachzuweisen war. Ferner konnte die Bindung von NGR-Cy5.5 durch Vorinkubation mit dem nicht markierten Peptid unterbunden werden. In vivo konnten die HT-1080 haltigen Xenograften bis zu 24 Stunden nach i.v. Injektion des NGR-Cy5.5 visualisiert werden. Mithilfe des FMT war es ferner möglich auch in tieferen Gewebestrukturen die Fluorochromverteilung zu analysieren und quantifizieren. So zeigten Tumoren z.B. fünf Stunden nach i.v. Injektion des NGR-Cy5.5 Konzentrationen von ca. 306,71 (±133,15) nM. Kompetitionsstudien mit freiem NGR-Peptid führten zu einer Reduktion der Fluorezenz auf 195,29 (±53,55) nM, was die Target-spezifische Bindungsaffinität des optischen Liganden unterstreicht. Schlussfolgerung: NGR-Cy5.5 erlaubt als spezifischer optischer Tracer die nicht invasive Detektion der APN/CD13-Expression in vivo. In Kombination mit neuen, innovativen Bildgebungsverfahren (FRI und FMT) stellt dies eine vielversprechende Strategie zur sensitiven Darstellung von Tumor-induzierter Angiogenese dar." @default.
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