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- W2099443887 abstract "Methylierung von Cytosin zu 5-Methylcytosin (5mC) dient der epigenetischen Kontrolle der Gentranskription in Säugetieren und hat direkte Auswirkungen auf die Entwicklung und Pathogenese des Menschen. Insbesondere die Diagnose und Prognostik von Krebspatienten profitierte in den letzten Jahren enorm von der Entwicklung neuer Methoden zur Analyse von DNA-Methylierungsmustern. Wir zeigen hier, dass zwei hitzestabile DNA-Polymerasen – die DNA-Polymerase KlenTaq aus Thermus aquaticus und die KOD-DNA-Polymerase aus Thermococcus kodakaraensis – 3′-fehlgepaarte Oligonukleotid-Primer gegenüber 5mC effektiver verlängern als gegenüber nichtmethyliertem C. Wir konnten außerdem eine DNA-Polymerase-Mutante mit weiter verbesserter 5mC/C-Diskriminierung erzeugen. Diese Mutante wurde erfolgreich in einer neuartigen 5mC-Detektierungsmethode eingesetzt, die es ermöglicht, den Methylierungszustand eines Cytosins direkt durch PCR von unbehandelter genomischer DNA zu bestimmen." @default.
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