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• W2100070397 abstract "La protéase nexine 1 (PN-1), serpine tissulaire, est le plus puissant inhibiteur connu de la thrombine in vitro et inhibe l’uPA et le t-PA. Cependant son rôle physiologique dans l’hémostase et la thrombose n’est pas établi. Notre objectif a été de caractériser la PN-1 plaquettaire quant à sa localisation et à sa fonction régulatrice de la thrombine et de l’uPA in vitro et in vivo. La PN-1 a été analysée par cytométrie en flux et western blot. L’inhibition de la thrombine et l’uPA a été mesurée par un test amidolytique. La génération de thrombine a été analysée par thrombinographie sur plasma riche en plaquettes (PRP). La sensibilité des plaquettes sauvages (WT) et PN-1-/- à la thrombine a été mesurée par FACS et agrégation plaquettaire. Le rôle de la PN-1 plaquettaire dans la thrombose a été d’abord étudié ex vivo en chambre de perfusion sur matrice de collagène et in vivo par microscopie intravitale. La PN-1 est détectée à la membrane et dans les granules α des plaquettes. La PN-1 sécrétée lors de l’activation plaquettaire inhibe la thrombine et l’uPA. La génération de thrombine en PRP en absence de PN-1 est significativement augmentée (anticorps bloquant ou plaquettes PN-1-/-) indiquant que la PN-1 plaquettaire inhibe la thrombine et sa génération. La mesure de l’expression de la Psélectine et le taux d’agrégation des plaquettes PN-1-/- montre une hypersensibilité à la thrombine par rapport aux plaquettes WT. Ex vivo, la formation de thrombi sur une surface de collagène en condition de flux est également augmentée en absence de PN-1. In vivo, le déficit en PN-1 résulte en une accélération de l’occlusion vasculaire dans un modèle de thrombose expérimentale. Nous montrons pour la première fois que la PN-1 plaquettaire, stockée dans le granule α a une activité anticoagulante via l’inhibition de la thrombine et de sa génération. La PN-1 plaquettaire inhibe également l’uPA aussi bien que le PAI-1 plaquettaire. Nous montrons également pour la première fois que la PN-1 plaquettaire a une activité antithrombotique et joue un rôle régulateur sous estimé dans la thrombose." @default.
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