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- W2134266099 abstract "Marek's disease virus (MDV), a highly cell-associated lymphotropic alphaherpesvirus, is the causative agent of a neoplastic disease in domestic chickens called Marek's disease (MD). In the unique long (UL) region of the MDV genome, open reading frames UL39 and UL40 encode the large and small subunits of the ribonucleotide reductase (RR) enzyme, named RR1 and RR2, respectively. MDV RR is distinguishable from that present in chicken and duck cells by monoclonal antibody T81. Using recombinant DNA technology we have generated a mutant MDV (Md5ΔRR1) in which RR1 was deleted. PCR amplification of the RR gene in Md5ΔRR1-infected duck embryo fibroblasts (DEF) confirmed the deletion of the 2.4 kb RR1 gene with a resultant amplicon of a 640-bp fragment. Restriction enzyme digests with SalI confirmed a UL39 deletion and the absence of gross rearrangement. The biologic characteristics of Md5ΔRR1 virus were studied in vitro and in vivo. The Md5ΔRR1 replicated in DEF, but significantly slower than parental Md5-BAC, suggesting that RR is important but not essential for replication in fibroblasts. In vivo studies, however, showed that the RR1 deletion virus was impaired for its ability to replicate in chickens. Inoculation of specific-pathogen-free (SPF) chickens with Md5ΔRR1 showed the mutant virus is nonpathogenic and does not induce MD in birds. A revertant virus, Md5ΔRR1/R, was generated with the restored phenotype of the parental Md5-BAC in vivo, indicating that RR is essential for replication of the virus in chickens. Protection studies in SPF chickens indicated that the Md5ΔRR1 virus is not a candidate vaccine against MD.La deleción de la subunidad mayor de la ribonucleótido reductasa (RR) del virus de la enfermedad de Marek afecta el crecimiento del virus in vitro e in vivo.El virus de la enfermedad de Marek (MDV), un alfaherpesvirus linfotrópico altamente asociado a células, es el agente causal de una enfermedad neoplásica en pollos domésticos llamada enfermedad de Marek (MD). En la región única larga (UL) del genoma del virus de Marek, los marcos de lectura contínuos UL39 y UL40 codifican las subunidades mayor y menor de la enzima ribonucleótido reductasa (RR), denominadas RR1 y RR2, respectivamente. La enzima ribonucleótido reductasa del virus de Marek es distinguible de la presente a partir en las células de pollo y pato mediante el anticuerpo monoclonal T81. Con el uso de tecnología de ADN recombinante se ha generado un virus de Marek (Md5ΔRR1) en el cual la subunidad RR1 ha sido eliminada. La amplificación mediante PCR del gene RR en fibroblastos de embrión de pato (DEF) infectados por el virus Md5ΔRR1, confirmó la deleción de la subunidad RR1 de 2.4 kb con un amplicón resultante de un fragmento de 640 pb. La digestión con la enzima de restricción SalI confirmó una deleción del UL39 y una ausencia de reordenamiento. Las características biológicas del virus Md5ΔRR1 se estudiaron in vitro e in vivo. El virus Md5ΔRR1 se replicó en fibroblastos de embrión de pato, pero su replicación fue significativamente más lenta que la del virus progenitor Md5-BAC, lo que sugiere que la enzima ribonucleótido reductasa es importante pero no esencial para la replicación en los fibroblastos. Sin embargo en estudios in vivo, se demostró que el virus con deleción de la subunidad RR1 resultó afectado en su capacidad para replicarse en pollos. La inoculación de pollos libres de patógenos específicos (SPF) con el virus Md5ΔRR1 mostraron que el virus mutante no es patógeno y no induce la enfermedad de Marek en las aves. Un virus revertiente, Md5ΔRR1 / R, se generó con el fenotipo restaurado del virus progenitor Md5-BAC in vivo, lo que indica que la ribonucleótido reductasa es esencial para la replicación del virus en los pollos. Estudios de protección en pollos libres de patógenos específicos indicaron que el virus Md5ΔRR1 no es un candidato para elaborar una vacuna contra la enfermedad de Marek." @default.
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