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• W2220643558 abstract "Die biochemische Analyse von Hormonen wird durch drei Variablen beeinflusst –die praanalytischen, analytischen und postanalytischen Variabilitat. Bezuglich deranalytischen und biologischen Variabilitat wurden fur Nager schon zahlreicheArbeiten veroffentlicht, jedoch ist die Praanalytik in der Untersuchung vonBlutproben von Ratten, in Bezug auf die Hormonanalytik, bislang kaum beachtetworden. Deswegen wurden in dieser Arbeit einige Aspekte der Praanalytik bei derHormonmessung in Ratten genauer untersucht; auch um Anhaltspunkte zu geben,in wie weit vorbehandelte Blutproben von Ratten zur Messung unterschiedlicherHormone genutzt werden konnen und wie sich die Verwendung unterschiedlicherProbenmaterialien, als auch Einfrier-Auftau-Zyklen, auf die Messergebnisseverschiedener Stoffwechselhormone auswirken konnen. In Bezug auf diebiologische Variabilitat wurde der Einfluss von Alter und Fasten auf ausgewahlteStoffwechselhormone bei der Ratte genauer untersucht.Ziel dieser Arbeit war es, in Analyseprozessen insbesondere auf den Faktor„Praanalytik“ einzugehen und aufzuzeigen, in welchem Ausmas Ergebnisse in derMessung von Hormonen mittels Immunassays beeinflusst werden konnen.Im Vergleich zu reinem Serum waren die gemessenen Konzentrationen von IGF-I(+9,2%, p<0,001), IGF-II (+24,0%, p<0,001), IGFBP-3 (+24,0%, p<0,001) undLeptin (+54,9%, p<0,0001) in EDTA-Plasma signifikant niedriger, GH (-137,8%,p<0,001) und Gesamt-Ghrelin (-10,8%, p<0,05) zeigten erhohte Werte, fur IGFBP-2, Gesamt-GIP, aktives GLP-1, Insulin und Gesamt-Ghrelin zeichneten sich keineDifferenzen ab. Nach zehn Einfrier-Auftau-Zyklen von Serum blieben dieKonzentrationen von GH, IGF-I, IGFBP-2 und aktivem GLP-1 unverandert, beiGesamt-GIP (+49,8%, p<0,001), Insulin (+32,9%, p<0,001) und Gesamt-Ghrelin(+24,6%, p<0,001), konnte eine geringere Menge detektiert werden und bei IGF-II(-25,9%, p<0,01), IGFBP-3 (-19,3%, p<0,001) und Leptin (-41,3%, p<0,001)wurden hohere Werte gemessen. EDTA-Plasmaproben, die ab dem Moment derAbnahme von der Ratte bis zum gefrorenen Aufbewahren ununterbrochen gekuhltwurden, zeigten keine signifikanten Unterschiede zu solchen Proben, die beiRaumtemperatur bis zum Einfrierprozess aufbewahrt wurden. Die Zugabe vonProteaseinhibitoren, im Speziellen von DPP-4-Inhibitor, ist fur die Bestimmungvon Inkretinhormonen angezeigt. In dieser Studie wurde keine erhohte Variabilitatdurch den Zusatz der Proteaseinhibitoren auf die Messung von Gesamt-GIP und aktivem GLP-1 gefunden. Fur die Messung von acyliertem Ghrelin ist eineAnsauerung des Probenmaterials mit HCl empfehlenswert. IGF-II, IGFBP-2,IGFBP-3, Gesamt-GIP und Insulin konnten mit dieser Probenvorbehandlungbedenkenlos gemessen werden. Fur Leptin (-73,91%, p<0,05) wurden erhohteKonzentrationen detektiert, IGF-I (+11,9%, p<0,001) und Gesamt-Ghrelin(+27,1%, p<0,05) zeigten hingegen verringerte Werte.In Bezug auf die biologische Variabilitat konnte ebenfalls ein signifikanter Einflussdes Alters und Fastens auf Ratten detektiert werden. Jungtieren hatten einendeutlicher niedrigeren Insulinspiegel (+0,22%, p<0,05) im Blut, bei einerFastendauer von 16 Stunden, im Vergleich zu wesentlich alteren 1-Jahr altenRatten. Im Vergleich der Insulinwerte zwischen 6 und 16 Stunden des Fastenskonnten signifikant niedrigere Werte nach 16 Stunden festgestellt werden (+30,7,p<0,05). Bei jungen Ratten reduzierte sich die Gesamt-GIP-Konzentration(+105,9%, p<0,01) wahrend des Fastens starker als bei alten Tieren, aber bei diesemHormon ist, bei Langzeitfasten aller Tiere, eine signifikante Reduktion der Gesamt-GIP-Konzentration (66,8%, p<0,05) im Vergleich von 6 zu 16 Stunden zuverzeichnen gewesen. Bei IGF-I und Gesamt-Ghrelin veranderten sich dieKonzentrationen der zirkulierenden Hormone im Blut trotz einer Fastendauer von16 Stunden nicht signifikant.Es konnten in dieser Arbeit einige Faktoren der Praanalytik, im Speziellen in derMessung von Hormonen mittels Immunassays bei Ratten, untersucht werden,jedoch sind auf diesem Themengebiet noch zahlreiche weitere Fragestellungen, wiezum Beispiel der Einfluss von Einfrier-Auftau-Zyklen auf EDTA-Plasma oder derEinfluss von Matrixeffekten auf Western Liganden Blot, noch nicht naheruntersucht, weswegen es sinnvoll erscheint diesbezuglich weitere Studienanzuschliesen." @default.
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