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- W2230200216 abstract "Durante a gestacao em animais que possuem placentacao hemocorial, a hipoxia no primeiro terco da prenhez e um dos fatores cruciais para inducao da angiogenese e o adequado desenvolvimento da placenta. Contudo, esta hipoxia se contrapoe a intensa atividade das celulas que requerem elevado metabolismo, gerando um estresse fisiologico para estas celulas presentes na interface materno-fetal. Presume-se que estas celulas necessitem de mecanismos apropriados de citoprotecao para sua sobrevida enquanto comprometidos ativamente no suporte funcional do utero gestante. Neste sentido, o presente trabalho teve como objetivo investigar a expressao e a distribuicao da proteina de choque termico 70 (HSP70) na interface materno-fetal durante a gestacao normal em camundongos e a sua possivel variacao em condicao de estresse adicional induzido experimentalmente atraves da lesao embrionaria. Sitios de desenvolvimento embrionario/fetal de camundongos prenhes do dia de gestacao (dg) 6 ao 17 e, apos 30 minutos, 1, 6 e 12 h dos animais submetidos a lesao cirurgida do embriao (LCE) no dg 9 foram coletados para: - processamento histotecnico convencional de embebicao em parafina destinados as analises citoquimicas (lectina DBA e reacao de TUNEL) e imunocitoquimicas (anti-HSP72/73, anti-PCNA); - embebicao em resina Lowilcryl- K4M para imunocitoquimica ultraestrutural (anti-HSP72/73); - obtencao de homogenados teciduais destinados a SDS-PAGE das fracoes proteicas e Westernblot (anti-HSP72/73) e, - extracao de RNA de homogenados teciduais e de celulas uNK isoladas para analise de transcritos (HSP72 e 73) com amplificacao pelo RTPCR. As analises imunocitoquimicas demonstraram que as celulas uNK eram as unicas celulas que expressavam de forma constante as isoformas HSP72/73 ao longo da gestacao, sendo confirmada a expressao dos transcritos genicos das isoformas HSP72/73 nas celulas uNK isoladas pelo RT-PCR. A imunomicroscopia eletronica detectou marcacao conspicua nas mitocondrias das celulas uNK. A analise quantitativa demonstrou que a lesao do embriao reduz o numero de celulas uNK positivas para HSP72/73 e, o SDS/PAGE/Western-blotting identificou as isoformas HSP72 e 73 presente nos homogenados teciduais do utero com uma perceptivel reducao na intensidade da banda correspondente ao HSP73 nas amostras de pos-lesao, sem afetar significativamente a isoforma HSP72. As analises realizadas com a dupla marcacao de TUNEL e PCNA demonstrarm reducao de celulas uNK PCNA positivas no utero submetido a lesao embrionaria e aumento de nucleos marcadas positivamente pelo TUNEL. Estes resultados demonstram de forma inedita a expressao de HSP72/73 nas celulas uNK, sendo inedita tambem a constatacao em leucocitos, sugerindo um papel citoprotetor para estas celulas importantes na manutencao da gestacao. A reducao de celulas uNK HSP72/73 positivas no utero gestante desencadeada pela lesao embrionaria, consubstancia a hipotese da atuacao da HSP 72/73 como chaperona citoprotetora nas celulas uNK sendo critica a atuacao da isoforma HSP73 presente na mitocondria atraves da regulacao negativa das vias de morte celular por apoptose nas celulas uNK Abstract" @default.
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