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- W2240597265 abstract "Este trabalho investigou a producao, extracao e purificacao da enzlma quitosanase. Planejamento fatorial fracionado 25-1 foi utilizado para obtencao de maiores niveis de quitosanase, avaliando o efeito das seguintes variaveis: concentracao de quitosana, concentracao de sulfato de amonio, pH, aeracao e tempo de fermentacao. As variaveis significativas para a producao da enzima quitosanase foram a concentracao de sulfato de amonio, aeracao, pH e as interacoes entre concentracao de sulfato de amonio e aeracao. A atividade maxima (l,5U/mL) foi alcancada em meio contendo 2,0% de quito sana, 4,0% de sulfato de amonio, aeracao 10 (relacao entre o volume do Erlenmeyer e o volume de meio de cultura), pH 5,8, 30°C em 16 horas de fermentacao. Purificacao primaria da enzima quitosanase foi desenvolvida por particao em Sistemas de Duas Fases Aquosas (SDFA). Cinco composicoes de SDFA foram investigadas, sendo o melhor sistema para separacao constituido de 22% PEG 1500 e 10% fosfato. Neste SDFA a enzima quitosanase foi recuperada na fase inferior (91%), obtendo-se um fator de purificacao de 5,2. Purificacao secundaria da enzima quitosanase foi desenvolvida por cromatografia preparativa de troca ionica (CTI) em resina S-Sepharose (cationica). A extracao e purificacao nas duas etapas (SDFA e CTI) resultaram em fator de purificacao de 20 vezes e 66% de recuperacao de quitosanase. Este processo de purificacao desenvolvido e potencialmente interessante para a ampliacao de escala, alcancando elevada recuperacao em apenas duas etapas. A massa molecular da enzima quitosanase purificada (47 kDa) foi determinada por eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS) e o ponto isoeletrico (8,8) foi determinado por focalizacao isoeletrica Abstract" @default.
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