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- W2274679440 abstract "As ureases sao metalo-enzimas niquel dependentes que catalisam a hidrolise da ureia para formar amonia e acido carbonico. As mesmas tem sido isoladas de uma grande variedade de organismos incluindo bacterias, fungos e plantas, mas ate o momento nao foram encontradas em animais. A atividade ureolitica das ureases permite que bacterias e fungos utilizem ureia como fonte de nitrogenio, possibilitando a sobrevivencia desses microorganismos em ambientes acidos, facilita a disponibilizacao de nitrogenio para embrioes de plantas em desenvolvimento e, contribuem para o mecanismo de defesa. A leguminosa Canavalia ensiformis , tambem conhecida como feijao-de-porco possui tres isoformas de ureases conhecidas ate o momento, a Jack Bean Urease (JBU); a jbure-II, o qual teve seu cDNA expresso em Escherichia coli para a producao do peptideo recombinante jaburetox (JBTX) e a canatoxina (CNTX). Estudos demonstraram que as ureases de C. ensiformis possuem propriedades biologicas independentes da atividade enzimatica, incluindo atividade inseticida e antifungica, efeito secretorio e ativacao de plaquetas, efeito pro-inflamatorio, ativacao da via dos eicosanoides, formacao de poros e atividade de canal ionico. Pretende-se com este trabalho avaliar o efeito da urease JBU de C. ensiformis , bem como do peptideo Jaburetox (JBTX) em linhagens de celulas tumorais e investigar os efeitos citotoxicos e genotoxicos. Serao utilizadas linhagens celulares derivadas de adenocarcinoma de mama humano, carcinoma de ovario humano, adenocarcinoma de colon humano, glioblastoma humano, câncer de pulmao humano e fibroblasto murino. Para a avaliacao da citotoxicidade serao realizados os ensaios MTT (dimetil tiazoldifenil tetrazolium), para estimativa de proliferacao e sobrevivencia celular, e o ensaio de sobrevivencia clonogenica, que estima a sobrevivencia de celulas in vitro com base na capacidade de uma unica celula crescer e formar colonia. A determinacao da genotoxicidade sera realizada atraves do ensaio cometa, o qual detecta danos no DNA que sao passiveis de correcao, como quebras, excisao e ligacoes cruzadas; e do teste de micronucleos que avalia indiretamente quebras cromossomicas permanentes e perda cromossomal. Sendo as ureases enzimas de interesse bioquimico e biotecnologico e, considerando seus efeitos tanto no contexto farmacologico quanto toxicologico, e pertinente a investigacao dos possiveis efeitos destas proteinas em linhagens de celulas tumorais e nao tumorais, de modo a investigar se a mesma possui propriedades citotoxicas e/ou genotoxicas. Os possiveis mecanismos tornam-se relevantes para elucidacao dos modos de acao em insetos, em fungos e na patogenese de algumas doencas bacterianas." @default.
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- W2274679440 title "AVALIAÇÃO DOS EFEITOS CITOTÓXICOS E GENOTÓXICOS DA UREASE DE CANAVALIA ENSIFORMIS E DO PEPTÍDEO RECOMBINANTE JABURETOX EM LINHAGENS DE CÉLULAS TUMORAIS" @default.
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