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• W2275117343 abstract "Os efeitos deleterios que a morte encefalica (ME) exerce sobre a qualidade dos orgaos para transplante tem sido estudados desde a decada de 90. Acredita-se que alteracoes hemodinâmicas, neuro-humorais e imunologicas decorrentes da ME sejam os principais fatores que alteram a qualidade dos orgaos. Tais efeitos negativos para orgaos como o coracao, rins, figado e pulmoes vem sendo investigados. O transplante de ilhotas pancreaticas e uma promissora alternativa terapeutica para pacientes diabeticos tipo 1, contudo, devido as baixas taxas de sucesso, o procedimento ainda e realizado apenas em carater experimental. Diversos estudos demonstram que o baixo sucesso se deve a fatores relacionados tanto ao isolamento (processo de digestao do pâncreas) quanto ao transplante das ilhotas nos pacientes. Entretanto, pouco se sabe sobre os efeitos negativos que a ME exerce sobre a qualidade das ilhotas para transplante. Mesmo assim, todos os estudos em modelos animais ate o momento publicados que buscam desenvolver melhorias no procedimento de isolamento e transplante de ilhotas pancreaticas utilizam animais vivos como doadores. Assim, o desenvolvimento de um modelo animal de ME sera de grande valia na busca da melhor compreensao dos efeitos causados pela ME sobre o tecido pancreatico. Tal modelo sera utilizado para o teste de drogas e procedimentos que visem a amenizar os possiveis danos causados pela ME sobre as ilhotas pancreaticas. Apos diversos experimentos para otimizacao do procedimento cirurgico, um protocolo de ME pode ser desenvolvido e consistentemente reproduzido na Unidade de Experimentacao Animal (UEA) do Hospital de Clinicas de Porto Alegre (HCPA). Brevemente, ratos Wistar machos pesando entre 300-350 gramas foram utilizados, os animais foram anestesiados com Isoflurano e apos entubados com cânula plastica (Abbocath® no 14), sendo ventilados em ventilador volumetrico com volume corrente de 2 ml e frequencia de 100 ciclos/min. A pressao arterial media foi medida continuamente por meio de canulacao da arteria femoral. Para o procedimento de inducao da ME os animais foram posicionados em decubito ventral e submetidos a trepanacao na regiao frontolateral esquerda com auxilio de uma broca odontologica, sem dano cerebral direto. Atraves desse orificio foi posicionado um cateter de embolectomia (Fogarty® 4 Fr.) na regiao epidural, com insuflacao de 0,60 ml de solucao salina durante 60 segundos. O diagnostico da ME foi confirmado por meio de criterios clinicos (dilatacao pupilar e ausencia de reflexo corneo-palpebral) e hemodinâmicos (crise hipertensiva seguida de hipotensao neurogenica sustentada). Apos os procedimentos de inducao da ME, os animais foram mantidos com ventilacao mecânica por 6 horas adicionais. Entao, foram realizados a pancreatectomia e pulsao cardiaca para coleta do sangue periferico. As amostras de sangue e pâncreas coletadas serao analisadas por diversos metodos para identificar-se a expressao genica de citocinas pro-inflamatorias indicadoras de um possivel efeito negativo exercido pela ME sobre o tecido pancreatico. Alem disso, a viabilidade celular das ilhotas pancreaticas sera tambem avaliada. Futuramente, o modelo tambem sera utilizado em experimentos de transplante de ilhotas e teste de drogas capazes de amenizar os efeitos deleterios da ME. Projeto aprovado pela Comissao de Etica no Uso de Animais (CEUA) – HCPA Projeto GPPG – 11-0623. Apoio financeiro: CNPq, FIPE-HCPA, FAPERGS." @default.
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