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- W2299726257 abstract "植物體內小分子量熱休克蛋白質 (small heat shock protein, sHSP) 為普遍存在且具高度保留性,其分子量約為15-30 kDa,在逆境中植物常被誘導累積小分子量熱休克蛋白質,這類蛋白質具有分子伴護(molecular chaperone)的功能,可保護植物適應逆境。根據多重校對分析 (multiple sequence alignment) 可知,水稻小分子量熱休克蛋白質共可分成十四個不同的族群 (class),目前第二族群共有兩個小分子量熱休克蛋白質。本研究係探討水稻第二族群小分子量熱休克蛋白質在經由生物及非生物性逆境處理後其誘導情形、並測試其在大腸桿菌 (Escherichia coli) 中的異源保護效果及生體外 (in vitro) 之分子伴護活性測試,此外,為瞭解實際水稻幼苗的反應,也測試了水稻幼苗於非生物性逆境之交互適應情形。由結果可知,水稻幼苗經42℃水浴、5 mM 過氧化氫及紫外光 (UV-C) 處理後,發現OsHSP19.0-CII及OsHSP18.0-CII基因皆有被誘導的情形;另外,亦想探討其對水稻病原真菌立枯絲核菌之反應,結果得知在接種水稻後第四天, OsHSP18.0-CII基因表現量會下降,而OsHSP19.0-CII基因在接種後表現量並無差異。利用大腸桿菌 [E. coli strain BL21 (DE3) ] 表現重組小分子量熱休克蛋白質OsHSP19.0-CII及OsHSP18.0-CII,在50℃水浴、5 mM過氧化氫及紫外光 (UV-C) 處理下,小分子量熱休克蛋白質OsHSP18.0-CII的重組蛋白質可對大腸桿菌提供保護效果,而小分子量熱休克蛋白質OsHSP19.0-CII的重組蛋白質只有在50℃水浴處理下可保護大腸桿菌。利用純化之OsHSP19.0-CII及OsHSP18.0-CII重組蛋白質,以檸檬酸合成酶當做基質,在1 M 過氧化氫逆境下測試其分子伴護活性,得知此二水稻第二族群小分子量熱休克蛋白質皆有分子伴護活性。水稻幼苗經42℃水浴預處理兩小時以誘導熱休克蛋白質累積,再經由5 mM之過氧化氫處理5小時後,利用氯化三苯基四氮唑染色法 (triphenyl tetrazolium chloride reduction test) 來測試水稻幼苗之細胞活性,發現經由42℃預處理之水稻幼苗可誘導表現小分子量熱休克蛋白質,並讓水稻幼苗於後續的氧化逆境中降低其細胞活性受損程度,而OsHSP19.0-CII及OsHSP18.0-CII基因表現量於42℃預處理再經過5小時的28℃水浴或過氧化氫處理後,皆比無預熱處理者來的高,且其細胞活性受損程度的降低與過氧化氫酶 (catalase) 及過氧化酶 (peroxidase) 此二抗氧化酵素無關。" @default.
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