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- W2517089327 abstract "真核細胞におけるクロマチンDNAの複製とその調節機構を研究するために, SV40感染細胞を低濃度のジギトニン処理し,基質透過性とした細胞(permeable cell)の超微構造と同細胞内におけるSV40クロマチンDNA複製系の諸条件を検討し,基質要求性と阻害剤や制癌剤の影響を解析した.その結果, (1)至適なジギトニン濃度(100～150μg/ml),処理温度(25℃),塩濃度(50～100μM KCl),蔗糖濃度(0.1～0.15M), Mg2+濃度(5～7mM),反応温度(30°～37℃)などの基礎的諸条件を決定した. (2)このジギトニン処理透過性細胞は超微構造的に細胞膜は障害されているが,他の内膜系や核クロマチンは比較的よく保たれている. (3)この透過性細胞系では,細胞質抽出液を加えなくても,基質としての4種のデオキシリボヌクレオシド三リン酸(d ATP, d CTP, d GTP, 各0.1mM, d TTP, 0.01mM)の他, ATP (2～5mM)とMg2+ (5mM)の添加で効率のよいDNA合成が行なわれる. (4) EDTA, NEM,アフィディコリン, ara CTPでDNA合成がほとんど完全に阻害され, dd TTPでは全く阻害されないので,この系のDNA合成は複製的DNA合成である. (5)アドリアマイシンなどの制癌剤でSV40 DNAの複製が直ちに強く阻害されることを見出した.したがって,本実験系は真核細胞におけるクロマチンDNAのin vitro複製の研究のみならず,アドリアマイシンなどのDNA合成阻害制癌剤の作用を調べる上に極めて有用な実験系として役立つものと考えられる." @default.
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