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• W2529799263 abstract "Si la chromatographie liquide couplee a la spectrometrie de masse est un outil de bioanalyse largement utilise pour la quantification des molecules de faible poids moleculaire dans les fluides biologiques, il n'en est pas de meme pour les macromolecules. Au cours de ce travail, nous avons explore les possibilites et les difficultes d'une methode d'extraction par immunoaffinite couplee de la spectrometrie de masse pour la quantification des proteines recombinantes et des biomarqueurs. Cette strategie a tout d'abord ete appliquee a une petite proteine therapeutique, Epi-hNE4, un inhibiteur de l'elastase humaine et pour lequel nous avons obtenu une sensibilite de 80 pM. Cette methode a egalement ete appliquee a un anticorps therapeutique utilise pour le traitement du cancer colorectal, Cetuximab, pour lequel une sensibilite de130 pM a ete obtenue grâce a une extraction par l'EGFR, sa cible biologique. Ce dernier developpement offre des perspectives pour evaluer l'immunogenecite des proteines therapeutiques. La methode de reference est la technique ELISA, que nous avons appliquee a la detection d'anticorps anti-Epi-hNE4, mais les difficultes rencontrees suggerent que la spectrometrie de masse serait une alternative interessante. Enfin, une derniere application de la spectrometrie de masse pour la quantification multiplexee des biomarqueurs a ete menee sur les apelines, une famille de peptides de 12 a 36 acides amines jouant un role crucial dans le systeme cardiovasculaire. Une limite de detection de l'ordre de 25 pM a ete atteinte, et de facon interessante, cette methode nous a permis de conclure a l'absence des formes supposees circulantes." @default.
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