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• W262203644 abstract "El potencial de desarrollo de los embriones producidos in vitro es afectado negativamente por un lado, a defectos en las cualidades intrinsecas de los ovocitos y por el otro, a las condiciones del medio de maduracion in vitro. Asi, el exito de la maduracion in vitro depende de la integridad de los factores intrinsecos en la maduracion y la vitalidad nuclear y citoplasmatica de los ovocitos, tambien a la adecuada combinacion de los componentes empleados en el medio de maduracion. En este sentido, el objetivo de esta tesis consistio en analizar la influencia de distintos componentes anadidos durante la maduracion in vitro sobre la calidad del ovocito y el potencial de desarrollo del embrion, con la finalidad de mejorar el rendimiento en la produccion in vitro de embriones de terneras prepuberes. En el primer trabajo, se evaluo los efectos de la adicion del complejo Insulina-Transferrina-Selenio y Acido ascorbico al medio de maduracion in vitro de ovocitos de ternera prepuberes, ya que tienen un papel muy importante frente al estres oxidativo producido en condiciones in vitro. Los resultados demostraron una mejora del potencial de desarrollo de aquellos ovocitos que fueron madurados solamente las primeras 12 horas en presencia de ITS y Acido Ascorbico y las 12 horas restantes en un medio convencional, donde ademas se revelo una relacion positiva entre el incremento del nivel de expresion de la ciclina B1, la distribucion de los granulos corticales hacia la periferia y la mayor tasa de blastocistos. En el segundo trabajo se analizo si la adicion de leptina en distintas concentraciones incrementaba la tasa de blastocistos, porcentaje de apoptosis de las celulas del cumulus y el nivel de transcripcion de genes involucrados con la apoptosis y la competencia del ovocito. Los resultados indicaron que la adicion de la leptina en los medios de maduracion in vitro no incremento el potencial de desarrollo embrionario, ni disminuyo los niveles de apoptosis en las celulas del cumulus, existiendo un incremento en los niveles de apoptosis a mayor dosis de leptina. Por otro lado, las distintas concentraciones de leptina durante la maduracion in vitro ocasionaron un bloqueo en la transcripcion del receptor de la leptina (LEPR). En el tercer trabajo se propuso analizar durante la maduracion in vitro la inhibicion de una cisteina proteasa lisosomal, utilizando E-64 que es un inhibidor de la Catepsina B. Los resultados demostraron que la inhibicion de la Catepsina B no incremento el potencial de desarrollo embrionario, ni la calidad del embrion, incremento los niveles de apoptosis en las celulas del cumulus y la expresion de la proteina Catepsina B. Finalmente, la diferentes concentraciones de E-64 durante la maduracion in vitro no produjo un efecto inhibitorio de la Catepsina B, probablemente relacionados a una degradacion por aumento del estres y el efecto toxico de las altas concentraciones. En conclusion, nuestros estudios indican que la adicion de moleculas como la leptina o E-64 durante la maduracion in vitro de ovocitos de ternera prepuberes no mejora su capacidad intrinseca para el desarrollo embrionario. En cambio, los resultados obtenidos indican que es posible incrementar el porcentaje de blastocistos obtenido mediante la adicion del complejo Insulina-Transferrina-Selenio y acido ascorbico al medio durante las 12 primeras horas de maduracion." @default.
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