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- W2772422730 abstract "Introduction Les modeles d’etude de l’epithelium bronchique humain sont limites. Les cellules pluripotentes induites (iPS), capables d’un auto-renouvellement illimite et d’une capacite de differenciation en tous les types de tissus de l’organisme offrent un modele unique de modelisation in vitro des etapes precoces du developpement pulmonaire normal et pathologique. Cependant, cette approche necessite une tres bonne connaissance du developpement embryonnaire et fœtal du poumon humain. Methodes Chaque etape du developpement pulmonaire est reproduite in vitro au decours du processus de differenciation dirigee et necessite une induction reproductible et robuste definie par une combinaison de marqueurs proteiques. Le protocole a ete adapte pour les lignees PSCs utilisees au laboratoire et modifie selon la litterature [1] , [2] . L’etape APS est caracterisee par la presence de MIXL1, BRACHYURY et l’extinction des marqueurs de la pluripotence, le DE par une combinatoire CXCR4/SOX17 et les progeniteurs bronchiques vAFE par l’expression de NKX2.1 et l’absence du marqueur de differenciation hepatocytaire alpha-FP. Resultats Les resultats de differenciation dirigee des iPS vers un epithelium bronchique que nous avons realises montrent une induction robuste de DE en cytometrie en flux (n = 6) : CXCR4 > 95 % et une etape de ventralisation de l’AFE ayant permis d’obtenir > 80 % de progeniteurs bronchiques NKX2.1+ en cytometrie en flux, AFP negatif (marqueur de differenciation hepatocytaire) (n = 3). La maturation de ces a permit d’obtenir un epithelium NKX2.1+ exprimant les marqueurs de differenciation bronchique FOXJ1 et CFTR en RT-PCR. Conclusion La differenciation dirigee permet d’obtenir en une semaine des progeniteurs bronchiques NKX2.1+ avec une excellente purete, etape necessaire a la production de cellules bronchiques a partir d’iPS. Reproduire un epithelium bronchique differencie et fonctionnel issu des iPS permettra de comprendre le developpement normal et pathologique de l’epithelium bronchique." @default.
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