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- W2783307241 abstract "L'infection par le virus de l'hepatite C (VHC) est consideree comme un probleme de sante publique du fait de sa prevalence (1,2% en France) et de sa gravite puisque dans 70% des cas son evolution est chronique et peut conduire a un hepatocarcinome. La transmission du virus se fait principalement par voie parenterale mais, pour 20% des contaminations, aucun facteur de risque n'est retrouve. Le diagnostic est soit serologique (detection des anticorps seriques grâce a des antigenes recombinants ou synthetiques) soit moleculaire (detection de l'ARN viral par RT-PCR, NASBA ou ADN branche). La PCR quantitative et le genotypage des souches ont permis l'amelioration du suivi du traitement. La therapeutique par l'IFNα est efficace dans 20% des cas et son association a la ribavirine a permis de doubler le nombre de bonnes reponses durables au traitement. De nouvelles strategies therapeutiques (IFNα pegyle, IFNα consensus, IFNα lymphoblastoide, les inhibiteurs de la protease, les ribozymes) et vaccinales (vaccin a virus genetiquement attenue, vaccin a virus recombinant ou injection d'ADN nu) sont a l'etude, mais un obstacle majeur a l'avancee de ces travaux subsiste : l'absence de systemes de culture permettant la multiplication efficace du virus. C'est ce constat qui a motive la partie scientifique de ce travail. Plusieurs travaux ont montre qu'il etait possible de maintenir le VHC en culture sur des cellules hepatocytaires et lymphocytaires mais aussi dans les cellules de rein de singe vert d'Afrique (lignee Vero). Dans la plupart de ces systemes, la multiplication du VHC reste modeste et aucune adaptation du virus n'a ete observee. L'objectif du present travail a ete de selectionner une lignee cellulaire originale permettant une replication stable du VHC. Les cellules Namalwa (lymphocytes B), PLC/PRF/5 (lignee d'hepatocarcinome), Vero et les cellules AP61 de moustique Aedes pseudoscutellaris (jamais utilisees pour la multiplication du VHC in vitro) ont ete incubees avec un plasma VHC positif, lavees 6 fois puis prelevees a differents temps post-infection. Le genome du VHC a ete detecte dans les cellules Vero et AP61 par RT-PCR pendant 28 jours et 7 jours pour les autres lignees. Les virus extraits des cellules prelevees aux differents temps ont servi d'inoculum pour des cellules AP61 et Vero saines et 4 passages viraux successifs ont ete possibles pour ces deux modeles cellulaires. La detection par cytofluorimetrie des molecules CD81 (recepteur suppose du VHC) a la surface des 2 lignees a revele que les cellules Vero exprimaient ces molecules de surface alors que les cellules AP61 en etaient depourvues. Cette etude a donc permis de selectionner un modele original de multiplication et d'etude du VHC : les cellules AP61. Ces cellules pourraient disposer d'un recepteur cellulaire pour le VHC specifique et compatible avec l'evolution phylogenetique du virus au contact des arthropodes (deja constatee avec d'autres Flaviviridae). Si ce recepteur etait fonctionnel in vivo, la transmission du VHC par piqure de moustiques pourrait etre evoquee." @default.
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