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• W2912693397 abstract "Lorsqu'un patient se presente chez son medecin traitant pour des douleurs abdominales faisant penser a une maladie du pancreas, il est crucial de distinguer les pathologies pancreatiques benignes des malignes. Non seulement, il est actuellement difficile de diagnostiquer le cancer du pancreas de maniere precoce, mais ce dernier est souvent confondu avec des maladies inflammatoires benignes du pancreas. Environ 5 a 10% des patients qui se font operer pour suspicion de cancer de pancreas ont en fait une maladie inflammatoire benigne du pancreas, principalement une pancreatite chronique ou une pancreatite auto-immune.A l'aide de differentes techniques de recherche, j'ai investigue les relations entre les facteurs present dans le sang et le tissu pancreatique de plusieurs groupes de patient souffrant de maladie du pancreas. Ainsi, j'ai identifie quatre marqueurs biologiques qui ensemble permettrait de distinguer ces differentes pathologies sous forme d'une approche simple et non- invasive. Ceci permettrait ainsi d'eviter des operations risquees et inutiles chez certains patients.--L'identification de biomarqueurs diagnostiques est cruciale pour ameliorer le diagnostic precoce du cancer du pancreas (PDAC) et augmenter le taux de tumeurs curatives resecables. Non seulement il est difficile de diagnostiquer le PDAC de maniere precoce, mais ce dernier est souvent confondu avec des maladies inflammatoires benignes du pancreas. Environ 5 a 10% des patients qui se font operer pour suspicion de PDAC ont en fait une maladie inflammatoire benigne du pancreas, principalement une pancreatite chronique (CP) ou un des deux sous-types de pancreatite auto-immune (AIP-1 ou AIP- 2) a l'examen pathologique final.Dans un premier projet, les niveaux de cytokines seriques et tissulaires ont ete analyses retrospectivement en utilisant une technique d'analyse multiple de 17 mediateurs inflammatoires. Au total, le serum de 73 patients, compose de 29 AIP (14 AIP-1 et 15 AIP-2), 17 CP et 27 PDAC, et le tissu pancreatique de 36 patients, dont 12 AIP (six AIP-1 et six AIP- 2), 12 CP et 12 PDAC, ont ete analyses. Leur distribution situ a ete evaluee par immunohistochimie et le degre d'inflammation a ete evalue par histologie. En comparant le serum des patients AIP et PDAC, des concentrations significativement plus elevees ont ete trouvees dans l'AIR pour les interleukines IL-1(3, IL-7, IL-13 et le facteur stimulant les colonies de granulocytes (G-CSF). G-CSF a egalement permis de differentier la AIP de la CP. De plus, une fois l'AIR divise en sous-types, des taux seriques significativement plus eleves d'IL-7 et de G-CSF ont ete mesures dans les deux sous-types d'AlP et dans l'AIP-2 pour l'IL-1 (3 compare au PDAC. G-CSF et TNF-a ont egalement ete significativement different dans les homogenats tissulaires entre AIP-2 et PDAC.Dans un deuxieme projet, differentes approches immunologiques (immunisation avec de l'adjuvant de Freund ou transfert adoptif) ont ete utilisees pour developper un nouveau modele murin pour la AIP utilisant la souche MRL / MpJ afin d'etudier les mecanismes physiopathologiques de la maladie. Aucune des deux approches n'a permis de trouver des resultats constants et fiables.Dans un troisieme projet, les relations d'auto-antigenes / auto-anticorps pour des maladies pancreatiques ont ete evaluees en utilisant des micropuces a proteines faites maison, composes d'environ ~ 6400 proteines recombinantes humaines. Pour ceci, on a analyse les fractions enrichies en immunoglobuline G du serum provenant de trois cohortes de patients (au total 300 patients) incluant cinq groupes de pathologie (PDAC, CP, AIP-1, AIP-2 et autres maladies gastro-intestinales) ainsi que des controles sains d'une cohorte provenant d'Heidelberg (Allemagne) et de Kobe (Japon). Nous avons d'abord analyse des groupements de patients puis chaque patient de maniere individuelle afin de retrecir au plus le nombre de candidats potentiels. Ceci a permis de trouver neuf nouveaux antigenes qui discriminent PDAC des maladies inflammatoires benignes du pancreas (CP et AIP). Parmi ceux-ci, Torsin-1B (TOR1B), Ring finger protein 138 (RNF138), Histone deacetylase 3 (HDAC3), BCL-2 related ovarian killer (BOK) and Leukocyte receptor cluster member 1 (LENG1) ont reagi preferentiellement et significativement avec les serum de patient atteint d'AIP. De plus, sur ces neuf antigenes trois candidats, la protein phosphatase 1 (PPP1R15A), le cytochrome P450 (CYP3A5) et la G protein-coupled receptor 3 (GPR3) ont ete capables de differencier les deux sous-types d'AlP en faveur de l'AIP-1.G-CSF, TOR1B, RNF138 et HDAC3 peuvent etre facilement imprimes sur de petites micropuces a proteines personnalisees afin d'etre mesure dans le sang de patient en routine. Cette approche simple et non-invasive permettrait le diagnostic differentiel des patients souffrant de douleurs abdominales evitant des operations risquees et inutiles chez certains patients.--Identification of diagnostic biomarkers is crucial to improve early diagnosis of pancreatic cancer (PDAC) and increase the rate of curatively resecable tumors. Not only it is difficult to diagnose PDAC in early stages, but also PDAC is often misdiagnosed with benign inflammatory diseases of the pancreas. Around 5-10% of patients that undergo surgery for suspected PDAC have in fact benign inflammatory disease of the pancreas mainly chronic pancreatitis (CP) or one subtype of autoimmune pancreatitis (AIP-1 or AIP-2) on final pathologie examination.In a first project, levels of serum and tissue cytokines were retrospectively analyzed using a multiplex analysis of 17 inflammatory mediators. In total, serum from 73 patients, composed of 29 AIP (14 AIP-1 and 15 AIP-2), 17 CP, and 27 PDAC, and pancreatic tissue from 36 patients, including 12 AIP (six AIP-1 and six AIP-2), 12 CP, and 12 PDAC, were analyzed. Their distribution situ was assessed by immunohistochemistry and the degree of inflammation was evaluated by histology. Comparing AIP and PDAC patients' serum, significantly higher concentrations were found in AIP for interleukins IL-1|3, IL-7, IL-13, and granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF). G-CSF also allowed discrimination of AIP from CP. Furthermore, once AIP was divided into subtypes, significantly higher serum levels for IL-7 and G-CSF were measured in both subtypes of AIP and in AIP- 2 for IL-1 (B when compared to PDAC. G-CSF and TNF-a were also significantly differentially expressed in tissue homogenates between AIP-2 and PDAC.In a second project, different immunological approaches (immunization with Freund's adjuvant or adoptive transfer) have been used to develop a new mouse model for AIP using the MRL / MpJ strain in order to study pathophysiological mechanisms of the disease. Neither of the approaches allowed finding constant and reliable results.In a third project, specific autoantigens / autoantibodies signatures for pancreatic diseases were assessed using in house-made protein microarrays consisting in total of -6400 full-length human recombinant proteins. IgG fractions from three different sample sets of total 300 patients were analyzed including 5 different groups of patients (PDAC, CP, AIP-1, AIP-2 and other gastrointestinal-diseases) and healthy patients from a Heidelberg (Germany) and a Kobe (Japan) cohort. Narrowing the selection of the candidates by a step-by-step approach using first pooled sera and then individual sera allowed to find nine new antigens that discriminate PDAC from benign inflammatory diseases of the pancreas (CP and AIP). Among them Torsin-1B (TOR1B), Ring finger protein 138 (RNF138), Histone deacetylase 3 (HDAC3), BCL-2 related ovarian killer (BOK) and Leukocyte receptor cluster member 1 (LENG1) reacted preferentially and significantly with sera from AIP patients, both subtypes (AIP-1 and AIP-2) and from both the Kobe and the Heidelberg cohorts. Furthermore, out of these 9 antigens three candidates; Protein phosphatase 1 (PPP1R15A), cytochrome P450 (CYP3A5) and G protein- coupled receptor 3 (GPR3) were able to discriminate between both subtypes of AIP in favorof AIP-1.G-CSF, TOR1B, RNF138 and HDAC3 can be easily spotted on small custom protein microarrays to be routinely measured in patient's serum. This would provide with a simple and non-invasive approach for differential diagnosis of patients with mid abdominal pain orientating patients with cancer to obtain the right therapy quickly and, on the other hand, avoiding risky and unnecessary surgery in some of CP and AIP patients" @default.
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