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• W2913134941 abstract "Les infections osteo-articulaires (IOA) chroniques a Staphylococcus aureus sont caracterisees par la destruction progressive du tissu osseux et la difficulte a eradiquer S. aureus, entrainant un grand nombre de rechutes (10-20%). Les principaux facteurs proposes pour ces echecs de traitement et cette persistance bacterienne sont la faible diffusion des antibiotiques dans le tissu osseux, la formation de biofilm et l’internalisation des bacteries par les osteoblastes (OB), cellules responsables de la mineralisation osseuse.Nos travaux, in vitro et in vivo, ont pour objectif d’apporter de nouvelles informations sur l’impact de S. aureus, et plus particulierement de l’internalisation de cette espece dans les osteoblastes, sur l’homeostasie osseuse.Dans un premier temps, nous nous sommes interesses a l’impact d’une infection sur des femurs de souris en utilisant deux souches cliniques de S. aureus deja utilisees et caracterisees au laboratoire. Une forte perte osseuse au niveau de l’os trabeculaire suite a l’infection a ete observee. De tels resultats sont en accord avec des travaux precedents montrant que S. aureus a un impact sur l’homeostasie osseuse en augmentant l’activite de resorption de l’os par les osteoclastes. Notre objectif etait de comprendre plus precisement l’origine de cette destruction osseuse et notamment si la differenciation et l’activite de mineralisation des osteoblastes, cellules primordiales a l’homeostasie osseuse, sont egalement affectees par l’infection.Nous avons pour cela mis en place un protocole de culture permettant la differenciation in vitro d’osteoblastes murins (lignee). En utilisant un modele de protection a la gentamycine, nous avons mis en evidence que l’infection par S. aureus entrainait une diminution de la differenciation des osteoblastes, caracterisee par une baisse d’activite et d’expression de la phosphatase alcaline (PAL). L’infection entrainait egalement une baisse de la capacite des osteoblastes a former une matrice minerale osseuse. L’expression du collagene de type I, fortement implique dans la phase de mineralisation etait diminuee et une tendance a la baisse des taux de depots calciques a ete observee. Ces effets semblaient plus marques lorsque la souche de S. aureus etait capable d’etre internalisee dans les osteoblastes. Cette observation nous a donc conduits a caracteriser le mecanisme de l’internalisation. Pour cela nous avons etudie la voie de l’integrine β1, voie d’entree majeure de S. aureus, en analysant les capacites d’internalisation de S. aureus dans des lignees d’osteoblastes mutees sur des proteines de cette voie de signalisation. Nous avons egalement utilise des inhibiteurs pharmacologiques ciblant ces memes proteines, seuls et en association, afin de preciser leur importance dans le processus d’internalisation.Cette derniere partie de l’etude nous a permis de confirmer l’importance des proteines Src1 et Rac1 ainsi que du trafic vesiculaire dans le mecanisme d’endocytose. L’objectif in fine de ce projet serait de trouver des voies therapeutiques innovantes, ciblees specifiquement sur l’internalisation et permettant ainsi de restreindre ou de supprimer totalement l’invasion de S. aureus dans le compartiment intracellulaire, afin de limiter le risque de chronicisation des infections osteoarticulaires." @default.
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