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• W422204313 abstract "In dieser Arbeit wurden erstmals Gene der Ackerbohne Vicia fabia L., die in der Rhizobien-Leguminosen und der arbuskularen Mykorrhizasymbiose spezifisch oder amplifiziert exprimiert werden, auf Proteinebene charakterisiert. Neben den ausschlieslich in den Wurzelknollchen vorkommenden Proteinen VfENOD18, VfNOD28/32 und VfNOD32 wurden Proteine untersucht, die von dem Mykorrhiza-amplifiziert exprimierten Gen VfCaMBP1 und dem in beiden Symbiosen der Ackerbohne spezifisch exprimierten Leghamoglobingen VfLb29 kodiert werden. Im einzelnen wurden immunologische Lokalisationsstudien an longitudinalen Dunnschnitten von Wurzelknollchen mittels Licht- und Elektronenmikroskopie durchgefuhrt. Die eingesetzten polyklonalen Antikorper wurden durch Immunisierungen mit heterolog exprimierten Fusionsproteinen oder mit synthetischen Peptiden gewonnen. Bei Hinweisen auf eine mogliche Funktion der Symbiose-relevanten Proteine schlossen sich biochemische Funktionsanalysen an.Homologievergleiche zeigten, dass das Nodulin VfENOD18 als neues, pflanzliches Mitglied der bakteriellen Mj0577 Superfamilie angesehen werden kann. Als ATP-bindendes Protein im Cytoplasma von infizierten Zellen der Stickstoff fixierenden Zone ist es moglicherweise an der Signaltransduktion im symbiontischen Gewebe beteiligt. Western Blot Studien und PCR-Experimente deuten auf eine Proteinfamilie fur Noduline vom ENOD18-Typ in Leguminosen der Triben Trifolieae, Vicieae und Hedysareae mit caesalpinioider oder crotalarioider Knollchenform hin. Die modularen Noduline VfNOD28/32 konnen Ca2+-Ionen binden und, da sie wahrscheinlich im Peribakteroidraum lokalisiert sind, moglicherweise den Transport des fixierten Stickstoffs vom Mikro- zum Makrosymbionten beeinflussen. Zumindest fur die Isoform VfNOD32a konnte zudem eine unterschiedlich starke Abundanz in einzelnen Knollchen nachgewiesen werden. Die Genprodukte der Knollchen- und Mykorrhiza-spezifisch bzw. Mykorrhiza-amplifiziert exprimierten Gene VfLb29 und VfCaMBP1 konnten bisher in Wurzelknollchen und mykorrhizierten Wurzeln der Ackerbohne nicht detektiert werden, so dass in beiden Fallen eine restriktive zeitliche und ortliche Regulation der Genexpression oder der Proteinsynthese angenommen werden kann. Auf biochemischer Ebene konnte VfCaMBP1 experimentell als Calmodulin-bindendes Protein identifiziert und seine Calmodulin-bindende Domane bestimmt werden. Es ist somit das erste Calmodulin-bindende Protein, das in der arbuskularen Mykorrhizasymbiose amplifiziert exprimiert wird. Mittels einer potentiellen Kernlokalisationssequenz konnte es in den Zellkern gelangen und dort eine Funktion im Zusammenhang mit einer Ca2+-Calmodulin vermittelten Signaltransduktion erfullen." @default.
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