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- W4237456084 abstract "Desarrollo de una técnica molecular que permita la identificación específicade especie de anisákidos parásitos humanos con el mínimo de muestra, independientementede su estado evolutivo. Se utilizaron larvas de nematodos obtenidas de pescados para el consumohumano. Se realizó reacción en cadena de la polimerasa con análisis del polimorfismo de losfragmentos de restricción (PCR-RFLP). Para ello se amplificó el ADN de anisákidos correspondientea las regiones ITS-1, gen del ARN ribosomal 5.8S, ITS-2 y aproximadamente 70 paresde bases del gen del ARN ribosomal 28S, incluyéndose un control de reacción interno. Los productosse digirieron posteriormente con la endonucleasa Taq I y por otra parte se secuenciaron. Se obtuvieron patrones de amplificación (fragmentos de 960 y 1.010 pb) y restriccióndiferentes según la especie de anisákido (Anisakis simplex/Hysterothylacium aduncum),que coincidieron con los ya descritos para los mismos parásitos pero de otras procedencias geográficas,y se confirmó una divergencia genómica. La especificidad del ensayo y la alta sensibilidad de la técnica, así como la ausenciade variaciones intraespecíficas, confirman la utilidad de esta prueba en la identificaciónde parásitos causantes de la anisakiasis humana, tanto en biopsias como a partir de las larvasextirpadas. We intended to develop a molecular test allowing a species-specificidentification of the anisakid human parasite independently of its evolutive stage. Anisakid larvae were obtained from fish destined to human consumption.In the PCR-RFLP test, the DNA corresponding to the ITS-1, 5.8S rRNA gene, ITS-2 and approximately70 of the 28S rRNA gene region was amplified and a positive control was included.Products were digested with the endonuclease Taq I and subsequently sequenced. Different anisakids (Anisakis simplex/Hysterothylacium aduncum) yield different amplification(960 and 1,010 bp fragments) and restriction patterns, which were in accord withpreviously described patterns of the same parasites from others geographical regions. The high sensitivity of the test and the absence of intraspecies variations confirmsthe utility of this assay in the identification of human parasites involved in humananisakiasis including larvae from resected biopsies." @default.
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