FRINK Linked Data Fragments server

Matches in SemOpenAlex for { <https://semopenalex.org/work/W4285798250> ?p ?o ?g. }

• W4285798250 abstract "Τα τρέχοντα πρωτόκολλα για τη γονιδιακή θεραπεία της θαλασσαιμίας περιλαμβάνουν τη συλλογή των αρχέγονων αιμοποιητικών κυττάρων (HSPCs) από τους ασθενείς, την in vitro καλλιέργεια και διαμόλυνσή τους με λεντι-ιικούς φορείς και τέλος τη μεταμόσχευση των γενετικά τροποποιημένων HSPCs στους μυελοκατασταλμένους ασθενείς. Το αυξημένο κόστος και η πολυπλοκότητα της μεθόδου, δυσχεραίνουν την εφαρμογή τέτοιων πρωτοκόλλων στις αναπτυσσόμενες χώρες, όπου η ανάγκη για θεραπεία της β-θαλασσαιμίας είναι τεράστια. Αναπτύχθηκε μια απλοποιημένη και ελάχιστα επεμβατική μέθοδος in vivo γονιδιακής θεραπείας, που περιλαμβάνει την κινητοποίηση των HSPCs από τον μυελό των οστών στην περιφέρεια του αίματος και την ενδοφλέβια έγχυση ενός υβριδικού, εξαρτώμενου συστήματος αδενο-ιικών φορέων (HDAd5/35++) και της Sleeping Beauty τρανσποζάσης (SB100X), που στοχεύει τον υποδοχέα CD46 του ανθρώπου, τροποποιώντας τα αρχέγονα αιμοποιητικά κύτταρα (HSCs) στην περιφέρεια. Τα γενετικά πλέον διορθωμένα κύτταρα, επιστρέφουν από την περιφέρεια του αίματος, όπου έγινε η διαμόλυνση, πίσω στο μυελό των οστών, όπου και παραμένουν μακροπρόθεσμα. H προσέγγιση αυτή ελέγχθηκε σε ένα ζωικό μοντέλο ποντικού που προσομοιάζει το φαινότυπο της ενδιάμεσης β-θαλασσαιμίας του ανθρώπου (CD46+/+/Hbbth-3). Οχτώ εβδομάδες μετά την in vivo γενετική τροποποίηση, χορηγήθηκε θεραπεία 4 δόσεων με χημειοτακτικούς παράγοντες (O6BG/BCNU) για την in vivo επιλογή των γενετικά διορθωμένων HSCs, αυξάνοντας την έκφραση της γ σφαιρίνης στο 76,0±5,7% των κυκλοφορούντων ερυθροκυττάρων, την εβδομάδα 29 μετά την in vivo γενετική τροποποίηση. Οι αιματολογικές παράμετροι βελτιώθηκαν σημαντικά, σε σημείο που δεν διακρίνονταν από τις φυσιολογικές τιμές, υποδηλώνοντας σχεδόν πλήρη φαινοτυπική διόρθωση. Τα ποντίκια που έλαβαν θεραπεία εμφάνισαν σημαντική μείωση α) στο μεγέθους του σπλήνα, β) στην εξωμυελική ερυθροποίηση και γ) στην παρεγχυματική αιμοσιδήρωση. Η ασφάλεια αποδείχθηκε από την καλή ανεκτικότητα της θεραπείας, την απουσία αλλαγών στην αιμοποίηση, τη φυσιολογική κλωνογενή ικανότητα των κυττάρων του μυελού των οστών και το πρότυπο τυχαίας ενσωμάτωσης του φορέα. Η αυξημένη παραγωγή εμβρυϊκής αιμοσφαιρίνης (HbF) κατά την ενήλικη ζωή, μια καλοήθης κατάσταση γνωστή ως Κληρονομική Παραμονή της Εμβρυϊκής Αιμοσφαιρίνης (HPFH), έχει αποδειχθεί ότι βελτιώνει τον κλινικό φαινότυπο της β-θαλασσαιμίας. Πρόσφατα, οι προσεγγίσεις επεξεργασίας γονιδιώματος (gene editing) οδήγησαν στην ανάπτυξη νέων θεραπευτικών προσεγγίσεων, επιτρέποντας τη στοχευμένη επανενεργοποίηση της HbF. Αναπτύχθηκε ένα σύστημα εξαρτώμενων, αδενοϊικών φορέων (HDAd5/35++), που στοχεύει τα HSCs μέσω του υποδοχέα CD46, με σκοπό την επανενεργοποίηση της έκφρασης της HbF. Αποτελείται από ένα σύστημα CRISPR/Cas9 για την ταυτόχρονη στόχευση, του ερυθροειδικού ενισχυτή του καταστολέα της HbF (BCL11A) και ταυτόχρονα της περιοχής πρόσδεσής του, στους υποκινητές HBG1/HBG2 της HbF (ΗDAd-CRISPR-Dual). Για τον έλεγχο αυτής της προσέγγισης, δημιουργήσαμε ένα θαλασσαιμικό ζωικό μοντέλο ξενομεταμόσχευσης, μεταμοσχεύοντας σε ποντίκια NBSGW, CD34+ κύτταρα από ασθενείς με β-θαλασσαιμία για να εδραιωθεί θαλασσαιμική αιμοποίηση, παρόμοια με του ανθρώπου. Έξι εβδομάδες μετά τη μεταμόσχευση, τα HSCs από το χιμαιρικό μυελό των οστών ποντικού κινητοποιήθηκαν επιτυχώς στην περιφέρεια μετά από χορήγηση G-CSF (250 μg/kg για 6 ημέρες) και Plerixafor (50 μg/kg για 4 ημέρες). Σαράντα λεπτά μετά την τελευταία δόση του Plerixafor, εγχύθηκε ενδοφλεβίως ο φορέας HDAd-CRISPR-Dual, που επιτρέπει την επιλεκτική in vivo γενετική τροποποίηση των HSCs του ανθρώπου, καθώς ο υποδοχέας CD46 δεν εκφράζεται στα HSCs του ποντικού. H ταυτόχρονη γενετική τροποποίηση των περιοχών BCL11A και HBG1/2, δεν αποδείχθηκε τοξική για τα θαλασσαιμικά CD34+ κύτταρα, ενώ τόσο in vitro, όσο και in vivo παρατηρήθηκε σημαντική αύξηση της HbF, που οδήγησε σε βελτίωση της ερυθροποίησης. Ένα πιθανό θέμα ασφάλειας όταν προκαλείται διπλό ρήγμα, καθώς στοχεύονται διπλές θέσεις στο γονιδίωμα ή/και περιοχές με σημαντική ομολογία μεταξύ τους, είναι οι χρωμοσωμικές αναδιατάξεις. Για το λόγο αυτό έγινε καρυοτυπική ανάλυση, η οποία σημαντικά, δεν κατέδειξε χρωμοσωμικές αναδιατάξεις ή/και απαλοιφές σε (τουλάχιστον) 20 μεταφάσεις που μελετήθηκαν, σε όλα τα δείγματα των ασθενών. Συμπερασματικά στην παρούσα διατριβή προτείνεται μια οικονομική και εύκολα μεταφράσιμη μέθοδο, η οποία καταργεί την ανάγκη λευκαφαίρεσης, μυελοκαταστολής και εξειδικευμένης εμπειρίας και μπορεί να οδηγήσει σε μια ευρύτερη κλινική εφαρμογή της γονιδιακής θεραπείας της θαλασσαιμίας." @default.
• W4285798250 created "2022-07-19" @default.
• W4285798250 creator A5043508222 @default.
• W4285798250 date "2022-07-19" @default.
• W4285798250 modified "2023-09-23" @default.
• W4285798250 title "In vivo και ex vivo γονιδιακή θεραπεία της θαλασσαιμίας με χρήση ενός αδενο-ιικού φορέα γ-σφαιρίνης" @default.
• W4285798250 doi "https://doi.org/10.12681/eadd/51997" @default.
• W4285798250 hasPublicationYear "2022" @default.
• W4285798250 type Work @default.
• W4285798250 citedByCount "0" @default.
• W4285798250 crossrefType "dissertation" @default.
• W4285798250 hasAuthorship W4285798250A5043508222 @default.
• W4285798250 hasConcept C10205521 @default.
• W4285798250 hasConcept C104317684 @default.
• W4285798250 hasConcept C129470790 @default.
• W4285798250 hasConcept C13373296 @default.
• W4285798250 hasConcept C185592680 @default.
• W4285798250 hasConcept C201750760 @default.
• W4285798250 hasConcept C203014093 @default.
• W4285798250 hasConcept C207001950 @default.
• W4285798250 hasConcept C26291073 @default.
• W4285798250 hasConcept C2776914184 @default.
• W4285798250 hasConcept C2778828106 @default.
• W4285798250 hasConcept C28328180 @default.
• W4285798250 hasConcept C54355233 @default.
• W4285798250 hasConcept C86803240 @default.
• W4285798250 hasConcept C95444343 @default.
• W4285798250 hasConcept C98108389 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C10205521 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C104317684 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C129470790 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C13373296 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C185592680 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C201750760 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C203014093 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C207001950 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C26291073 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C2776914184 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C2778828106 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C28328180 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C54355233 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C86803240 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C95444343 @default.
• W4285798250 hasConceptScore W4285798250C98108389 @default.
• W4285798250 hasLocation W42857982501 @default.
• W4285798250 hasOpenAccess W4285798250 @default.
• W4285798250 hasPrimaryLocation W42857982501 @default.
• W4285798250 hasRelatedWork W14980940 @default.
• W4285798250 hasRelatedWork W17959179 @default.
• W4285798250 hasRelatedWork W18023806 @default.
• W4285798250 hasRelatedWork W18584205 @default.
• W4285798250 hasRelatedWork W1994851 @default.
• W4285798250 hasRelatedWork W2021146 @default.
• W4285798250 hasRelatedWork W7796473 @default.
• W4285798250 hasRelatedWork W8474815 @default.
• W4285798250 hasRelatedWork W8532973 @default.
• W4285798250 hasRelatedWork W22179379 @default.
• W4285798250 isParatext "false" @default.
• W4285798250 isRetracted "false" @default.
• W4285798250 workType "dissertation" @default.