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- W575703313 abstract "Les proteines d’adhesions homophiles N-cadherine jouent un role majeur dans le developpement du cerveau, notamment en agissant sur la croissance et la plasticite synaptique. Au cours de ma these, j’ai etudie le role de la N-cadherine dans ces deux processus en utilisant des neurones issus de cultures primaires deposes sur des substrats micropatternes. Ces substrats sont recouverts de N-cadherine purifiee afin d’induire des adhesions N-cadherines selectives au niveau de micro-motifs regulierement espaces. Mes deux premieres etudes sont basees sur le modele d’embrayage moleculaire, decrivant le processus par lequel la motilite du cytosquelette d’actine se couple aux adhesions au niveau de la membrane cellulaire afin de generer des forces de traction aux zones de contact avec le substrat, permettant ainsi l’avancee cellulaire (Giannone et al., 2009). Plusieurs etudes ont mis en avant l’existence d’un tel modele (Mitchison et Kirschner, 1988 ; Suter et Forscher, 1998), cependant le mecanisme exact permettant d’expliquer ce couplage mecanique de l’actine aux proteines d’adhesions reste mal connu. Via des techniques de pinces optiques, des travaux precedemment menes dans l’equipe ont prouve l’existence d’un couplage entre le flux d’actine et les adhesions N-cadherine permettant la migration du cone de croissance (Bard et al., 2008). Cette technique n’a cependant pas permis la visualisation directe de l’engagement d’un tel mecanisme. Nous avons donc couple l’utilisation des substrats micro-patternes a la microscopie haute resolution sptPALM/TIRF afin de visualiser directement la dynamique des proteines impliquees dans l’embrayage moleculaire. Dans le premier article, j’ai montre pour la premiere fois l’existence d’interactions transitoires entre le flux d’actine et les adhesions N-cadherines au niveau du cone de croissance, refletant un embrayage glissant a l’echelle de la molecule unique (Garcia et al., en preparation). Dans le second article, en travaillant sur des neurones plus matures, nous avons pu montrer l’engagement d’un embrayage moleculaire trans-synaptique entre adhesions N-cadherines et flux d’actine permettant la stabilisation du filopode dendritique et ainsi sa transition en epine mature (Chazeau/Garcia et al., en preparation). J’ai egalement participe a une troisieme etude dans laquelle j’ai observe l’effet des substrats micropatternes recouverts de N-cadherine, sur la synaptogenese. J’ai ainsi pu prouver que la N-cadherine deposee sur les micro-motifs, stimule la croissance dendritique et axonale et joue un role preponderant dans la maturation morphologique des neurones. Cependant, la N-cadherine est incapable d’induire la formation de synapses contrairement aux proteines d’adhesion neurexine/neuroligine ou SynCam (Czondor et al., 2013)." @default.
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