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- W601430243 abstract "L'etude presentee dans la premiere partie de ce travail, porte sur la regulation post-transcriptionnelle d'une famille d'ARN (pIL) exprimes preferentiellement dans des fibroblastes de souris transformes ou en croissance active. Comme leurs homologues chez le rat, ces ARN contiennent une sequence repetee. Nous avons pu demontrer que le nombre des transcrits pIL est module par un element de regulation compose d'une region non repetee contenant des motifs communs a tous ces ARNs et d'un element repete. La fixation de proteines au niveau de cette sequence regulatrice a ete mise en evidence par des experiences de retardement sur gel. Ces transcrits pIL sont, d'autre part, trouves dans des ovocytes de souris fecondes ou non fecondes. Nous nous sommes interesses aux regulations intervenant lors de ces premiers stades du developpement. Un autre modele original etait disponible du fait de l'observation qu'un fragment de 343 pb d'ADN genomique lorsqu'il est injecte dans un oeuf de souris cause l'arret precoce des divisions embryonnaires. Nous avons mis en evidence, par les memes techniques que precedemment, plusieurs sites de fixation proteique sur ce fragment. Dans un premier temps, nous nous sommes concentres sur l'un d'entre eux, le motif GTCACATG (identique au motif CDEI des centromeres de la levure S. Cerevisiae). Lorsque des oligonucleotides contenant ce motif sont microinjectes dans un ovocyte de souris feconde, on observe un effet toxique comparable a celui obtenu avec le fragment de 343 pb. Nous avons clone et sequence un ADN complementaire, codant pour une proteine (CDEBP) se fixant de facon specifique sur cet octamere. L'analyse de la sequence deduite en acides amines a revele des regions d'homologies inattendues avec la proteine precurseur de l'amyloide impliquee dans la maladie d'Alzheimer. Nous avons perturbe l'expression de la proteine CDEBP dans l'oeuf, en utilisant des oligonucleotides complementaires au messager codant pour elle. De nouveau, ces experiences ont abouti a l'arret tres precoce du developpement embryonnaire. Nous avons caracterise un deuxieme site de fixation sur le fragment de 343 pb, vraisemblablement reconnu par un complexe proteique. Grâce a des experiences de competition, nous avons pu mettre en evidence l'existence d'interactions entre les proteines se liant specifiquement aux deux sites de reconnaissance etudies. Ces proteines cellulaires, ADN-affines, paraissent donc essentielles lors des premiers stades de la division de l'embryon de souris." @default.
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