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- W617101758 abstract "La phosphorylation/dephosphorylation des proteines est un mecanisme de signalisation intracellulaire commun. Parmi les kinases vegetales, les Mitogen-Activated Protein Kinases (MAPKs) sont impliquees dans de nombreux processus biologiques importants, comme la reponse aux stress biotiques et abiotiques, le developpement et la dynamique du cytosquelette. Chez Arabidopsis thaliana et ce malgre de nombreux efforts, les fonctions des kinases impliquees dans les cascades MAPK restent peu inconnues. L'activation des kinases en utilisant des mutations mimant la phosphorylation des sites normalement phosphoryles est une approchequi a fait ses preuves dans le cas de MAP2Ks et a largement contribue a elucider leurs fonctions. Cette strategie s’est revelee impossible dans le cas des MAPKs, puisque les residus a muter restent encore a identifier. Pour contourner ce probleme, nous avons adapte un crible base sur la complementation fonctionnelle d’un mutant MAPK de levure avec des formes aleatoirement mutees de MPK6d’Arabidopsis dans le but d'identifier des mutants presentant une activite constitutive. Nous en avons identifies plusieurs et avons montre que ces formes constitutivement actives (CA) de MPK6 sont actives sans phosphorylation par les MAP2Ks. Par ailleurs, les mutations des residus equivalents dans d'autres MAPKs les rendent egalement hyperactives, ce qui indique que cette strategie peut etre utilisee comme approche generale pour activer les MAPKs afin d’en comprendre les fonctions. L’etude des interactions proteine-proteine et l’analyse des profils dephosphorylation indiquent que les MAPKs CA conservent leur specificite envers leurs substrats et interacteurs. Comme preuve de concept, nous avons genere des formes actives du MPK4. La MPK4 CA exprimee sous son propre promoteur a parfaitement complemente le mutant mpk4. La caracterisation des lignees exprimant MPK4 CA confirme le role negatif de cette kinase dans les reponses de defense aux pathogenes des plantes que ce soit dans la PTI (PAMP Triggered Immunity) ou dans la ETI (Effector Triggered Immunity). Globalement, ce travail permettra de fournir des informations directes sur les cibles des MAPKs et devrait contribuer a la comprehension globale de la transduction du signal chez les plantes." @default.
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