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- W72849384 abstract "Candida albicans es uno de los patogenos oportunistas humanos mas importante, produce diferentes tipos de infecciones desde superficiales hasta sistemicas (en individuos inmunocomprometidos). Los macrofagos son elementos cruciales de la inmunidad innata y adquirida contra la candidiasis. Su plasticidad funcional y diversidad fenotipica les confiere la capacidad de desplegar una gran variedad de mecanismos para eliminar el microorganismo. Por esta razon, nos propusimos ahondar mas en la respuesta inmunitaria frente a las candidiasis invasivas tomando como modelo la interaccion macrofago-C. albicans. Para ello se han realizado estudios de expresion diferencial de proteinas en la linea celular murina RAW 264.7, en fracciones enriquecidas en proteinas citosolicas, de membranas-organelas, nucleares y de citoesqueleto por medio de 2D-DIGE, asi como un estudio proteomico y fosfoproteomico por SILAC en extractos totales.El estudio de las funciones de las proteinas y fosfoproteinas de expresion diferencial identificadas, revela que los principales procesos biologicos implicados en la respuesta son: la respuesta proinflamatoria, el estres oxidativo, la reorganizacion de citoesqueleto, los cambios en el metabolismo y la apoptosis. Se han validado varias de estas funciones tanto por microscopia de fluorescencia como por western blotting. Ademas, para dilucidar si Candida inducia o inhibia la apoptosis en macrofagos se realizo un estudio de diferentes marcadores de tipicos de una celula apoptotica, como son, la condensacion de cromatina, la fragmentacion del DNA y la activacion de la Caspasa 3. Este analisis nos revelo que la levadura esta inhibiendo la apoptosis en los macrofagos, bien como un mecanismo del sistema inmunitario para contener al patogeno y reforzar las defensas o, como factor de virulencia de Candida.Asimismo, con el fin de averiguar si la respuesta de los macrofagos humanos se corresponde con la de los murinos, se puso a punto un modelo de interaccion C. albicans-macrofagos M1 (proinflamatorios) o a M2 (antiinflamatorios) y se analizaron mediante 2D-DIGE las diferencias proteomicas entre ambos tipos de macrofagos, asi como las diferencias entre las respuestas de ambos frente a la levadura. Este es el primer estudio proteomico que compara estos aspectos, el cual revelo grandes diferencias metabolicas entre los macrofagos M1 y M2, siendo la Fructosa 1,6-bifosfato un posible marcador de activacion de los macrofagos hacia un fenotipo M1 o proinflamatorio. Ademas, demostramos que la interaccion con C. albicans parece llevar a un cambio de los macrofagos M1 o proinflamatorios hacia una respuesta M2 o antiinflamatoria, lo cual podria contribuir a la patogenicidad de la levadura disminuyendo la respuesta inmune y favoreciendo su supervivencia o, bien podria tratarse de un mecanismo del sistema inmunitario para disminuir la inflamacion.Todos estos estudios combinando diferentes tecnicas proteomicas y tipos de macrofagos, nos han proporcionado muchos datos sobre las proteinas que estan relacionadas en la respuesta de los macrofagos a la infeccion por C. albicans, asi como a la identificacion de 327 nuevos sitios de fosforilacion en proteinas de raton." @default.
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