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• W761545558 abstract "Les mecanismes moleculaires impliques dans la fusion membranaire ont ete amplement etudies au cours des trente dernieres annees. Notre comprehension actuelle de ce phenomene est principalement basee sur des resultats obtenus par (1) le developpement de modeles physiques decrivant la fusion des membranes biologiques, (2) l’etude mecanistique et structurale des proteines de fusion membranaire des virus a enveloppe et (3) l’etude des evenements de fusion intracellulaire medies par les proteines SNARES dans les cellules eucaryotes. La decouverte du complexe SNARE fut l’aboutissement de travaux interdisciplinaires qui ont exiges un large eventail de techniques tel que la genetique de la levure, l’electrophysiologie, la biologie moleculaire, la biochimie cellulaire, la biophysique experimentale et l’imagerie. Tirant parti des paradigmes et techniques biophysiques qui ont emerges de ces etudes, nous avons examine les fonctions et mecanismes de regulation des domaines « coiled-coil » dans les processus de fusion intracellulaire impliquant des proteines de la famille des Longin-SNAREs ou des Mitofusines, deux machineries proteiques de fusion dont le mode d’action exact reste encore peu clair. La conception exacte des mecanismes moleculaires de la fusion membranaire requiert la reconstitution in vitro des proteines de fusion dans un large spectre d’environnement membranaire avec des proprietes biophysiques definies et facilement modulables. Idealement, ces systemes membranaires devraient permettre a l’experimentateur de controler la composition lipidique et proteique, ainsi que la topologie membranaire, afin de rendre compte de l’importante variabilite observee entre les differents compartiments de fusion cellulaire. La reconstitution dans des liposomes offre une incroyable flexibilite avec la possibilite de faire varier la plupart des parametres clefs et de creer un environnement minimal dans lequel les facteurs solubles et/ou membranaires peuvent etre ajoutes, seuls ou en combinaison, pour devoiler leur role avec clarte. Nous avons mis au point des systemes in vitro de reconstitution de proteines dans des plateformes membranaires artificielles pour nos deux systemes d’etudes (les deux proteines Longin-SNAREs TI-VAMP et Sec 22b, ainsi que les domaines « coiled-coil » des Mitofusines) et nous avons realise des experiences biochimiques pour caracteriser le mode d’action de ces proteines. L’objectif a long-terme de ce projet est de comparer les mecanismes moleculaires des machineries de fusion associes aux proteines SNAREs et Mitofusines, et ainsi de devoiler des similitudes structurelles et fonctionnelles entre (1) leur proteines de fusion principales et (2) leur facteurs regulateurs." @default.
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