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- W788188087 abstract "La thioredoxine, proteine omnipresente dans le monde vivant et multifonctionnelle, se caracterise par son activite de proteine disulfure oxydoreductase, sa thermostabilite et sa structure spatiale hautement conservee. Bien que la thioredoxine soit soupconnee d'etre impliquee dans divers processus biologiques, les connaissances de ses roles physiologiques se limitent aux thioredoxines de chloroplastes, essentielles a la croissance photosynthetique et regulant l'assimilation de dioxyde de carbone. Chez la bacterie photosynthetique facultative, Rhodobacter sphaeroides, les etudes prealables du systeme thioredoxine ont suggere son intervention dans la regulation par l'oxygene de la biosynthese de bacteriochlorophylle. Dans ce travail, nous avons developpe l'analyse genetique de la thioredoxine de R. Sphaeroides afin de caracteriser son fonctionnement in vivo et d'elucider les mecanismes gouvernant la regulation du gene trxA. De tels objectifs impliquaient en premier lieu de determiner la carte physique de la region trxA du chromosome de R. Sphaeroides et de sous-cloner cette region. Le promoteur du gene trxA a ensuite ete identifie lors d'analyses par deletion de fusions traductionnelles avec le gene lacZ sans promoteur d'E. Coli. Les roles de l'oxygene et la lumiere sur l'expression du gene trxA ont ete etudies par le biais d'hybridations ADN-ARN et par l'utilisation en trans de fusions trxA : lacZ. L'analyse transcriptionnelle, revelant un ARN messager trxA monocistronique a un niveau maximal en conditions photosynthetiques, indique que l'oxygene controle l'expression du gene trxA, par augmentation de la transcription en presence de tension elevee en oxygene. Cet effet de l'oxygene, confirme par les experiences de fusion traductionnelle, suggere un role protecteur de la thioredoxine de R. Sphaeroides contre le stress oxydatif. L'effet de la lumiere, non retrouve lors des analyses en trans de fusion trxA : lacZ, laisse supposer un controle de la lumiere via des sequences regulatrices differentes agissant en cis. Enfin, les experiences de construction du mutant deficient en thioredoxine, realisees par mutagenese site specifique ont montre d'une part, que la thioredoxine est indispensable a la croissance de R. Sphaeroides, et d'autre part, que la region en amont du gene trxA est essentielle a son expression en presence d'oxygene." @default.
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