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- W881112833 abstract "笔者利用体外培养的鼻咽癌(NPC)多细胞微球模拟体内实体瘤环境，观察抗NPC单克隆抗体(McAb) BAC5与中华眼镜蛇膜毒素(CT)及131I偶联物对体外培养NPC CNE2细胞微球的抑制或破坏作用，旨在为NPC的治疗探索一种新的方法。 材料与方法 1.McAb制备。McAb BAC5为小鼠IgG1亚型，由腹水抗体经正辛酸-硫酸铵盐析法粗提后，经离子交换法层析制得［1］。 2.CT。由广州医学院蛇毒研究所提供。 3.碘标记物的制备。BAC5和小鼠IgG的131I标记用氯胺-T法，125I-CT的制备用Iodogen法，标记物的纯化用Sephadex G-25柱层析法，纸层析法测其放射化学纯度>95%。 4.BAC5和125I-CT的偶联。利用异型双功能偶联剂3-(2-吡啶乙基)丙酸-N-琥珀酰亚胺酯(SPDP，Sigma产品)，参照文献［2］，将2个蛋白质分子偶联制备125I-CT-BAC5，经Sephadex G-100柱层析纯化，以SDS-PAGE和放射自显影分析其纯度。 5.CNE-2细胞微球的培养。根据Chen等［3］报道的方法，将CNE-2细胞制成1 000个细胞/5 mL RPMI 1640完全培养液，加入用质量分数0.75%琼脂糖铺底的6孔培养板中，连续培养10 d，待微球长到300 μm时，全部吸到一带盖的消毒离心管中，自然沉降，去上清，再加5 mL培养液轻轻将沉底吹起，再自然沉降，去上清，以5 mL培养液将沉底轻轻吸到一培养皿中，用吸管挑取大小接近、较圆的微球，放到质量分数0.75%琼脂糖铺底的24孔培养液中，每孔5个，继续培养至400 μm左右。 6.治疗实验。每组5个微球，加0.6 mL培养基，0.4 mL治疗液。①对照组：自然生长微球，生理盐水0.4 mL；125I-CT组：8.6×10-7 mol/L; 131 I-mIgG组：1.11×1010 Bq/L；②131I-BAC5组：1.11×1010 Bq/L;③125I-CT-BAC5组：CT含量8.6×10-7 mol/L;④联合治疗组：125I-CT-BAC5 8.6×10-7 mol/L+ 131 I-BAC5 11.1 GBq/L。治疗24 h后更换新鲜培养液，每3 d更换1次。 7.疗效观察。用倒�" @default.
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