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- W962960570 abstract "O DNA mitocondrial (mtDNA) dos mamiferos e composto por cerca de 16.500 pares de bases, tem heranca exclusivamente materna, e codifica 13 polipeptidios essenciais para a funcao mitocondrial. Centenas a milhares de copias de mtDNA estao presentes nas celulas somaticas dependendo da necessidade energetica do tecido. No entanto, oocitos contem mais de 150.000 copias, no minimo uma ordem de magnitude maior que a quantidade presente na maioria das celulas somaticas. Alem disso, uma vez que o mtDNA nao e replicado durante o desenvolvimento inicial, a quantidade de mtDNA por celula diminui a cada ciclo celular. Portanto, o numero de copias presentes no oocito deve ser suficiente para atender as necessidade energeticas das celulas embrionarias ate que a replicacao do mtDNA seja restabelecida. Considerando que ha uma grande variabilidade da quantidade de mtDNA entre oocitos e que alguns trabalhos tem relacionado infertilidade e copias de mtDNA no oocito, a quantidade de mtDNA poderia ser utilizada para selecionar embrioes mais competentes a se desenvolverem. Para testar esta hipotese utilizou-se como modelo experimental o bovino uma vez que o desenvolvimento embrionario desta especie e muito mais similar ao do humano que o de camundongo. Para tanto, em um primeiro experimento foram utilizados oocitos bovinos provenientes de foliculos de diferentes tamanhos. Oocitos oriundos de foliculos pequenos, os quais sao sabidamente menos competentes a se desenvolverem a blastocisto, continham menos mtDNA comparado com oocitos oriundos de foliculos maiores. No entanto, devido a grande variabilidade do numero de copias, num segundo experimento embrioes partenogeneticos no estadio de uma celula sofreram biopsia para se determinar o conteudo de mtDNA antes de serem cultivados para acessar a capacidade de desenvolvimento. Em contraste com achados previos, o numero de copias de mtDNA nas biopsias nao diferiu entre embrioes competentes e incompetentes, indicando que o conteudo de mtDNA nao esta relacionado com a competencia de desenvolvimento a blastocisto. Para confirmar este achado, embrioes no estadio de uma celula foram depletados em mais de 60% do seu conteudo de mtDNA por centrifugacao seguido da remocao de parte da fracao citoplasmatica rica em mitocondrias. Surpreendentemente, os embrioes depletados desenvolveram-se normalmente a blastocisto, os quais continham numero de copias de mtDNA similar a controles nao manipulados. O desenvolvimento dos embrioes depletados foi acompanhado por um aumento na expressao de genes (TFAM e NRF1) que controlam a replicacao e transcricao do mtDNA, indicando uma habilidade intrinseca do embriao bovino em restaurar o conteudo de mtDNA no estadio de blastocisto. Em conclusao, embrioes bovinos competentes sao capazes de regular o conteudo de mtDNA no estadio de blastocisto independentemente do numero de copias presente no oocito. Estes achados contrariam o que foi descrito em camundongos, ressaltando a necessidade de estudos com especies mais semelhantes ao homem antes do uso clinico do mtDNA como ferramenta para o diagnostico de fertilidade em mulheres. Alem disso, este trabalho tem implicacao na manipulacao da heranca mitocondrial e, portanto, na prevencao da transmissao de serias patologias causadas por mutacoes no mtDNA Abstract" @default.
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